银杏根腐病病原菌分离及防治药剂筛选

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银杏常被应用于城市绿化,目前在国内各地均出现夏季焦叶现象,严重影响了其景观效果。调查发现,焦叶的银杏植株普遍存在根系腐烂的现象,且焦叶现象越严重,根系腐烂程度越严重。为找出银杏根系腐烂的主要致病菌及有效防治药剂,从而缓解银杏焦叶问题。本文对染病根系进行了病原菌分离及鉴定,在室内与田间进行了防治药剂筛选试验,最终通过研究杀菌剂对土壤微生物群落的影响确定最佳防治药剂。主要研究如下:(1)采用组织分离法,对4个地方的银杏根系病健组织进行病原菌分离,共分离得到21个菌株,其中19个真菌菌株,2个细菌菌株。经过柯赫氏法则验证,确定了2个真菌菌株SJZ-4,SJZ-5具有较强的致病性,为导致银杏根系腐烂的主要病原菌。根据菌落生长特征、外表形态及分生孢子形态等,初步确定这2个菌株均为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)。(2)采用菌丝生长速率法,利用带毒培养基对5种药剂进行室内毒力试验。结果表明,在供试浓度范围内,5种药剂对银杏根腐病病原菌菌丝生长均有不同程度的抑制作用。化学药剂中苯醚甲环唑抑菌效果较好:菌株SJZ-4的EC50值为120.2263μg/ml,其他药剂EC50的值均在143.7655μg/ml以上;菌株SJZ-5的EC50值为189.0067μg/ml,其他药剂EC50的值均在210.3378μg/ml以上。生物药剂枯草芽孢杆菌对2种病原菌均产生优异的拮抗作用,稀释9600倍时对两种菌的抑制率均在95%以上。(3)采用灌根的方式将5种药剂施入土壤中进行田间防治试验,以药剂控制焦叶效果作为衡量指标间接反应根腐病的防治效果。以焦叶程度的分级作为衡量指标,稀释300倍的枯草芽孢杆菌控制效果最好;苯醚甲环唑及多菌灵的田间控制效果次之;噻霉酮、恶霉灵控制效果相对较差,但也起到控制作用。以银杏焦叶面积率作为衡量指标时,苯醚甲环唑、枯草芽孢杆菌控制效果显著的高于其他几个处理,银杏焦叶面积率在20%以下。以银杏焦叶病情指数为衡量指标时,枯草芽孢杆菌的控制效果最好,为71.11%;苯醚甲环唑次之,控制效果为56.31%,多菌灵、噻霉酮、恶霉灵的控制效果依次为48.54%,28.64%,12.62%。综上所述,经药剂处理后银杏根腐病得到有效控制,在一定程度上缓解了焦叶问题,生物药剂枯草芽孢杆菌防治效果最好。(4)药剂进入土壤后,通过对土壤中镰刀菌菌落数量的测定可知,施药之后,土壤中镰刀菌的数量显著低于对照,随着时间的延长镰刀菌数量呈现趋于对照的趋势;生物防治药剂枯草芽孢杆菌则持续显著的抑制了镰刀菌的数量。通过对根际和根围土壤中微生物菌落数量的测定分析得出,根际土壤中微生物数量高于根围土壤中微生物数量。用药初期(30d后),经噻霉酮、枯草芽孢杆菌、多菌灵杀菌剂处理的土壤中细菌的数量显著增加,而真菌、放线菌的数量明显受到抑制;苯醚甲环唑、恶霉灵则显著抑制了土壤中各种微生物的数量。用药后期(105d),土壤中各微生物的数量呈现趋于对照的趋势。综合以上分析可知,枯草芽孢杆菌持续显著的抑制了镰刀菌的数量,而对真菌、细菌、放线菌数量的影响低于苯醚甲环唑、多菌灵。从用药安全性、可持续发展的角度综合考虑可知,枯草芽孢杆菌是防治根腐病进而缓解银杏夏季焦叶问题的最佳药剂。
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