饲粮添加叶酸对断奶仔猪生产性能和免疫功能的影响研究

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本研究分别建立仔猪免疫抑制和免疫激活模型,考察饲粮添加叶酸(FA)水平对断奶仔猪生产性能和免疫功能的影响,初步探讨了FA免疫调节功能和提高抗病力的机制,分别确定了不同免疫状态下断奶仔猪饲粮中FA的适宜添加量,为开发应用FA抗病营养提供了理论依据。研究共包括三个试验。试验一圆环病毒-Ⅱ攻击和饲粮叶酸水平对断奶仔猪生产性能和免疫功能的影响试验在圆环病毒-Ⅱ(PCV-2)阴性猪群中选择出45头初始体重为8.44±0.12kg的健康去势DLY仔猪,28±ld断奶后即饲喂添加不同水平FA(0,0.3和15mg/kg)的处理饲粮7d,第8天早上再以PCV-2攻毒每种饲粮处理中的一半仔猪建立模型,继续饲养28d。血样和组织样分别采集于第1d、第7天(攻毒前)、第21d和第35d。试验测定了各处理组仔猪生产性能、腹泻程度、器官指数、小肠形态、肺脏和淋巴组织病变、骨髓细胞增殖与凋亡、外周淋巴细胞凋亡和淋巴细胞亚群、血清免疫球蛋白和细胞因子水平的影响。结果表明:(1)有效地实施了PCV-2攻毒建模:PCV-2攻击显著降低了仔猪生产性能,并加剧了免疫抑制与组织损伤。(2)无PCV-2攻击下,各组仔猪因断奶应激强烈而出现程度不同的免疫组织损伤;饲粮添加FA15mg/kg明显改善了免疫机能:减轻了淋巴组织病变,增加了外周CD3+CD4+和(?)CD3+CD4+/CD3+CD8+提高了骨髓细胞增殖活性,影响骨髓细胞和外周淋巴细胞凋亡,使机体免疫状态得以改善。(3)PCV-2攻击下,因摄食基础饲粮导致机体FA缺乏而加剧了免疫抑制和组织病变;饲粮添加FA0.3mg/kg,较基础饲粮组减轻了淋巴组织病变,增加了外周CD3+CD4+和CD3+CD8+,提高了后期骨髓细胞增殖活性,降低了骨髓细胞细胞凋亡,可一定程度缓解PCV-2导致的免疫抑制;饲粮添加FA15mg/kg,仔猪前期外周淋巴细胞凋亡比例下降,后期骨髓细胞增殖活性较低,有利于PCV-2在体内的传播和复制,不利于仔猪耐受PCV-2后免疫系统修复。(4)有、无PCV-2攻击下,饲粮FA同一添加水平在断奶仔猪生产性能和免疫功能上的效应不同,适宜的添加剂量应不相同。试验二6-10kg断奶仔猪饲粮中叶酸适宜添加水平的研究试验采用单因素随机区组设计,共选用体重为6.93±0.07 kg的长大杂交(6,阉割)仔猪108头,21±1日龄断奶后即按体重分到36个圈,以添加FA水平不同(0、0.3、3、6、9和15.0 mg/kg)的试验饲粮饲喂。每个饲粮处理6个重复(圈),每个重复3头猪。试验期24d。试验结束时采集血样;测定了断奶仔猪生产性能、外周淋巴细胞亚群以及血清中FA、一氧化氮(NO)、免疫球蛋白G(IgG)和细胞因子(IFN-γ、TNF-α和IL-4)的含量。结果显示,饲粮添加FA水平有影响第24d BW、8-24d和0-24d ADG的趋势(P<0.1),极显著影响8-24d和0-24d G/F(P<0.01);断奶期饲粮添加FA 0.3-3mg/kg即显著提高了外周CD3+CD8+的比例(P<0.05),降低了CD3+CD4+/CD3+CD8+(P<0.05)和提高了血清IFN-γ水平(P<0.05)。结果表明,断奶期饲粮中添加FA可以改善仔猪免疫机能和增进抗病毒能力;改善仔猪的生产性能并主要体现在提高饲料效率上;在0-7d和8-24d维持仔猪最佳生产性能的FA适宜摄入量分别为1.4-1.5mg/d和2.9-3.0mg/d。试验三仔猪饲粮添加叶酸缓解脂多糖免疫激活作用的研究试验以添加不同FA水平(0、0.3、3.0、6.0、9.0和15.0mg/kg)的试验饲粮饲喂断奶仔猪24d后,按4×2+2因子设计,每种饲粮处理各选择仔猪7头进行脂多糖(LPS)攻毒(在试验第1、4和7d按LPS 200μg/kg BW肌肉注射),另以4个饲粮处理组(添加FA水平为0、0.3、3.0和9.0 mg/kg)的仔猪7头不攻毒(相应注射等体积生理盐水)作为对照,建立仔猪免疫激活模型。试验共选用了45±1日龄、初始体重为10.89±0.14 kg的长大杂交(♂,阉割)仔猪70头,并按体重相近配对分入10个处理组。每处理7个重复,一个重复一头猪,单圈饲养。分别在第7d注射LPS后3小时和第21d试验结束时采血。试验测定了仔猪生产性能,外周淋巴细胞亚群(CD3+、CD3-CD4+、CD3+CD8+)以及血清中葡萄糖、皮质醇、NO、IgG和细胞因子(IL-1β、IL-4、IL-10和TNF-α)的含量。结果显示:(1)本试验实施的LPS攻毒极显著降低了仔猪0-14d生长性能(包括ADG、ADFI和G/F,P<0.01),血清皮质醇、葡萄糖、IL-1β, IL-10和TNF-α含量激增,外周CD3+CD8+极显著下降(P<0.01),而CD3+CD4+/CD3+CD8+上升(P<0.01),激活并损伤了免疫系统,有效建立了免疫激活模型。(2)无LPS攻毒下,FA临界缺乏的基础饲粮导致仔猪生产性能下降,外周CD3+和血清NO降低;饲粮中添加适宜剂量的FA对于维护仔猪免疫系统的正常发育,以及获取较优生产性能具有必要性。(3)LPS攻毒下,饲粮FA添加剂量影响仔猪的免疫功能:添加FA 3-15mg/kg可部分缓解机体应激和炎性反应;添加FA15mg/kg可促进外周CD3+细胞的增殖分化来缓解LPS损伤,且可调节Th1/Th2平衡和增进体液免疫。饲粮添加适宜剂量的FA对于恢复期中的仔猪,具有增进机体恢复、促进生长和提高饲料效率的效应。(4)有/无LPS攻毒下,饲粮添加FA的效应不尽相同,适宜添加剂量不相同。本试验无LPS攻毒条件下,仔猪对FA的适宜摄入量:0-7d为3.6-4.3mg/d;8-21d为0.44-0.55mg/d;LPS攻毒条件下,仔猪在攻毒期间及后继恢复过程中对FA的适宜摄入量:0-7d为7.2 mg/d,8-14d为6.7-7.2 mg/d,1 5-21d为4.0-4.5mg/d。研究结果表明,仔猪断奶期饲粮FA临界缺乏可导致机体免疫细胞增殖分化不足,抗病毒能力下降,免疫系统易于被激活,生产性能下降。饲粮中添加FA能显著提高血清FA含量,改善生产性能,提高ADG和G/F;可以起免疫调节作用:增进免疫细胞增殖分化,影响免疫分子分泌,可调节外周CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+,能缓解免疫应激的危害。不同免疫状态下,仔猪饲粮添加FA的适宜剂量不同。正常免疫状态下,仔猪在断奶后0-7d、8-24d、25-31d和32-45d适宜的FA摄入量分别为1.4-1.5mg/d、2.9-3.0 mg/d、3.6-4.3 mg/d和0.44-0.55 mg/d。仔猪在LPS攻毒期间(0-7d)及其后继恢复过程中(8-14d和15-21d),适宜的FA摄入量分别为7.2 mg/d、6.7-7.2mg/d和4.0-4.5 mg/d。随着断奶仔猪的生长,日龄、体重和采食量增加,或免疫应激恢复期的延长,饲粮FA的添加水平应逐步下调。
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