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目的:1、评价20mg/kg染料木黄酮对兔颈动脉内膜剥脱+自体静脉移植术后血管重塑(VR)的干预作用。2、探讨兔颈动脉内膜剥脱+自体静脉移植术后20mg/kg染料木黄酮对血管壁MMP-2的表达及血浆NO、ET-1水平的影响。材料和方法:1、动物模型和分组6月龄成年雄性新西兰大白兔56只,分兔颈动脉内膜剥脱+自体静脉移植术后普通饮食组28只、兔颈动脉内膜剥脱+自体静脉移植术后20mg/kg染料木黄酮干预组28只。兔左侧颈总动脉内膜剥脱+颈前静脉自体静脉移植制作再狭窄模型,对侧假手术颈总动脉及颈前静脉为对照组,造模后取3天、7天、14天和42天4个观察时间点,每个时间点选7只模型动物,留取血浆后,血管标本原位灌注固定取材。2、病理学资料图像分析采用病理图像分析系统对标本HE,Masson染色片进行形态计量分析。3、免疫组化分析术后3天、7天、14天、42天免疫组化法测定血管标本中MMP-2的表达。4、化学法分析分别于造模前和造模后3天、7天、14天、42天采血测量血浆中NO的水平。用硝酸还原酶法测定硝酸根推算血浆NO水平,采用的NO试剂盒由南京建成生物所提供,血样由同一批试剂测试。5、用放免法测定血浆ET-1水平,采用的ET-1试剂盒由北京普尔伟业有限公司提供。结果:一、染料木黄酮对兔颈动脉内膜剥脱+自体静脉移植术后血管重塑的影响。1、内膜剥脱+自体静脉移植术后,移植静脉血管腔面积(LA)总体呈逐渐缩小趋势,3天组LA较对照组明显增大,7天、14天、42天组LA明显缩小,小于对照组并可见弹力纤维形成。染料木黄酮可明显抑制移植静脉的收缩性重塑,用药3天组LA较对照组无明显变化,14天、42天时LA较术后普通饮食组明显增大,有效抑制了收缩性血管重塑,有统计学意义。2、内膜剥脱+自体静脉移植术后,吻合口近端颈动脉内、外弹力板面积总体呈逐渐缩小趋势,术后3天、7天吻合口近端颈动脉呈现收缩性重塑,内膜局部形成;14天、42天时吻合口近端颈动脉LA明显缩小同时并发血管的收缩和硬化斑块的形成:染料木黄酮可明显抑制颈动脉的收缩性重塑。染料木黄酮干预组在术后3天时LA较对照组有显著性差异,7天时内外弹力板回缩较对照组有所减轻,14天、42天时内外弹力板回缩较对照组明显减轻,平滑肌细胞增殖减轻,有效抑制了收缩性血管重塑。二、染料木黄酮对兔颈动脉内膜剥脱+自体静脉移植术后MMP-2、NO、ET-1表达的影响1.血浆NO水平在术后3天、7天、14天时呈现低表达,42天时较造模前采血组,无显著性差异。染料木黄酮组3天、7天、14天时表达高于术后普通饮食组但低于造模前采血组,有统计学意义,42天时染料木黄酮组较造模前采血组无显著差异性。2.血浆ET-1水平在自体静脉移植术后普通饮食组呈现高表达,3天时明显升高后逐渐回落,42天时于造模前采血组无明显差异(P>0.05)。染料木黄酮组3天、7天、14天时表达低于术后普通饮食组(P<0.05),42天时染料木黄酮组较造模前采血组无明显差异(P>0.05)。3.血管壁MMP-2表达高峰出现至第14天。血管壁各层和总MMP-2表达率分别与对应血管重塑具有明显的相关性。染料木黄酮可以明显抑制MMP-2的表达。结论:1、本实验成功地制作了兔颈总动脉内膜剥脱+自体静脉移植术后再狭窄模型。2、再狭窄过程中动脉存在收缩性重塑现象,管腔的狭窄与否取决于血管重塑指数的变化。内弹力板面积(IELA)和外弹力板面积(EELA)可作为判断管腔狭窄及评价血管重塑的指标。染料木黄酮可明显减轻动脉的收缩性重塑。3、再狭窄过程中移植静脉存在扩张性和收缩性重塑现象,染料木黄酮可明显减轻静脉的收缩性重塑及内膜的增生。4、染料木黄酮可以抑制MMP-2、ET-1的产生,增加NO的产生,减轻术后再狭窄。