【摘 要】
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目的:利用三维打印制备聚乳酸-羟基乙酸（PLGA）支架,再用含有骨形态发生蛋白-9（BMP-9）和P-15多肽的水凝胶对支架进行修饰,观察支架复合物的结构及作用效果,并通过分析骨组织相关蛋白的表达来评价其在兔骨缺损修复中的应用方法:1、通过熔融沉积法制备聚乳酸-羟基乙酸共聚物三维支架,利用电子显微镜观察支架的空间结构,并用X-射线衍射仪、体外降解率和抗压强度对其进行相关表征;2、制备含有BMP-9
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目的:利用三维打印制备聚乳酸-羟基乙酸（PLGA）支架,再用含有骨形态发生蛋白-9（BMP-9）和P-15多肽的水凝胶对支架进行修饰,观察支架复合物的结构及作用效果,并通过分析骨组织相关蛋白的表达来评价其在兔骨缺损修复中的应用方法:1、通过熔融沉积法制备聚乳酸-羟基乙酸共聚物三维支架,利用电子显微镜观察支架的空间结构,并用X-射线衍射仪、体外降解率和抗压强度对其进行相关表征;2、制备含有BMP-9和P-15的水凝胶,用流式细胞仪检测不同含肽量组的细胞凋亡率,用电子显微镜观察细胞与支架的粘附性;3、为了分析支架复合物的作用效果,利用免疫印迹法检测碱性磷酸酶（ALP）、1型胶原蛋白（Col-I）、骨钙素（OCN）、RUNT相关转录因子2（RUNX2）和成骨相关转录因子（SP7）的表达;4、构建骨缺损模型,应用Micro-CT观察实验组和对照组中新骨形成情况,并检测骨组织相关蛋白在兔子骨缺损模型中的表达;结果:1、3D打印支架为圆柱形多孔结构,支架内径约1 mm,孔隙率良好,衍射峰分布较广,表明3D打印只涉及物理变化,不改变材料的性能,同时支架的降解率为9.38%,吸水率约为9.09%,抗压强度为15.83N/mm~2,满足生物支架的性能要求;2、在测定细胞凋亡率的实验中,将骨髓间充质干细胞与支架的共培养,可以发现2%的多肽组对骨髓间充质干细胞的诱导分化效果最为明显。而流式细胞仪检测显示,与对照组相比,0%和2%组均未引起明显的细胞凋亡。含2%和4%多肽的支架可促进BMSCs中ALP、Col-1、OCN、RUNX2和SP7的表达;3、体内实验显示,与对照组相比,2%多肽支架组碱性磷酸酶、Col-1、OCN、RUNX2、SP7蛋白的表达显著增加;4、Micro-CT检测表明,相较于其他实验组和对照组,2%多肽支架在骨缺损模型中具有良好的骨修复能力;结论:骨形态发生蛋白-9和P-15多肽水凝胶修饰的PLGA三维支架材料具有良好的生物相容性、机械性能和成骨性,可以诱导新骨生成,用于大尺寸骨缺损的修复和治疗是可行的。
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