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目的：1.研究单纯疱疹病毒1型(Herpes simplex virus typel, HSV-1)感染对神经胶质瘤细胞凋亡的影响。2.研究HSV-1感染对神经胶质瘤细胞神经营养因子(NGF、BDNF)及受体trkA、P75NTR表达变化情况的影响,探讨HSV-1感染诱导神经细胞凋亡的机制。方法：1.用HSV-1感染人神经胶质瘤细胞(U251),感染U251细胞6h后,RT-PCR、Western blot检测HSV-1糖蛋白D(gD)的表达情况；倒置显微镜下观察细胞形态学变化,流式细胞仪检测HSV-1感染对U251细胞凋亡的影响。2.体外培养U251细胞,HSV-1感染细胞后6h、12h、18h和24h收获细胞为实验组,以未感染细胞为对照组。RT-PCR检测U251细胞NGF、BDNF及受体trkA、P75NTR mRNA的转录水平,Western blot检测U251细胞NGF、BDNF及受体trkA、P75NTR蛋白的表达水平。结果：1.HSV-1感染U251细胞12h后,细胞形态学可见细胞间隙增宽,细胞肿胀变圆；18h后病变更加明显,绝大部分细胞变成圆形、椭圆形,胞体及胞核增大,细胞脱落,胞质混浊,细胞透光性降低；24h可见所有感染细胞均出现细胞病变效应(CPE)。2. RT-PCR、Western blot检测HSV-1gD的表达用于证实HSV-1可感染U251细胞,成功建立了U251细胞的HSV-1感染模型。流式细胞仪检测HSV-1感染U251细胞后,在第12h开始出现少量细胞凋亡,随感染时间延长,凋亡细胞增多,至第30h近半数细胞凋亡。在感染后24h、30h时,凋亡率分别为23.1%、25.1%与正常细胞凋亡率11%比较,差别具有统计学意义(P<0.05)。3.HSV-1感染U251细胞后,RT-PCR结果显示NGF和BDNF mRNA在各个时间点均有表达,其中第6h表达量最高,随时间延长表达逐渐下降；P75NTRmRNA在各个时间点也均表达,其在第12h达到最高,以后逐渐降低；而trkA mRNA在感染的开始阶段低表达,随时间延长逐渐降低,至24h表达消失。Western blot结果显示在不同时间段均有NGF、BDNF和P75NTR蛋白的表达,但未见trkA蛋白的表达,NGF蛋白在HSV-1感染后12h表达量最高,随时间延长表达逐渐下降；BDNF和P75NTR蛋白18h达到最高,以后逐渐降低。结论：1.HSV-1可在U251细胞内建立感染。2.HSV-1感染可诱导U251细胞发生凋亡。3.HSV-1感染致U251细胞凋亡过程中,神经营养因子及受体表达异常。其中NGF及其低亲和力受体P75NTR出现表达强度随时间先增强后减弱的趋势,而高亲和力受体trkA持续低表达,BDNF表达强度与NGF呈现一致的随时间先增强后减弱的趋势。推测神经营养因子及受体的异常表达可能参与了HSV-1感染致细胞凋亡的机制。