黄芪中有效成分的提取及不同干燥方法的研究

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本研究以中药材黄芪为试验材料,首先确定了黄芪多糖和黄芪皂甙含量测定的方法,并分别进行了黄芪多糖和皂甙提取工艺的参数的优化,然后比较了鲜黄芪干燥的不同方法,最后将提取所得的黄芪多糖进行了分离检测。主要试验结果如下:1黄芪中有效成分含量测定方法的建立。总糖含量的测定采用苯酚-硫酸法,还原糖含量的测定采用3,5-二硝基水杨酸比色法,多糖的含量采用总糖与还原糖的差值表示;测定黄芪皂甙的含量采用香草醛-冰醋酸法。2黄芪多糖提取工艺的研究。首先通过传统热水法提取黄芪多糖工艺的试验,得出该法最佳工艺为:粉碎度为40目,液料比值为20,提取时间2h,于100℃提取2次,所得黄芪多糖的平均含量为9.45%;由于纤维素酶在提取过程中能有效的促进多糖物质的溶出,进行了纤维素酶法提取黄芪多糖的研究。运用响应面法,通过Box-Behnken组合设计试验,利用Design Expert 7.0.3软件对试验数据进行多元回归拟合,回归方差分析显著性检验表明,纤维素酶法提取黄芪多糖工艺的优化方案是酶解pH值为4.0,温度为56.5℃,加酶量为61U/g,其多糖的平均含量达到20.31%,提取效果显著提高,所得模型回归显著,模型的R2=0.9962,模型与实际试验拟合较好,自变量与响应值之间线性关系显著,可用于黄芪多糖酶法提取试验的理论预测。各因素经回归拟合后,选择对响应值(多糖含量)显著的各项,得到纤维素酶法提取的黄芪多糖含量对编码自变量(酶解pH值、温度和加酶量)的二次多项回归方程为: Y=20.0042+0.46775x10.20663x2+0.158625x3+0.01025x1x2+1.47025x1x3+0.593x2x3-2.0111x12-1.48085x22-1.17485x32。根据回归方程制得不同因子的响应面分析图及等高线图。3黄芪皂甙提取工艺的研究。确定了提取黄芪皂甙的最佳工艺参数,试验表明采用乙醇体积分数为80%,液料比值为20,提取时间1.5h进行提取时,皂甙提取含量最佳。4鲜黄芪不同干燥方法的比较。通过试验研究发现,鲜黄芪采用不同的干燥方法所得的有效成分含量也不同,真空冷冻干燥方法能够最大限度的保持鲜黄芪的有效成分的含量。5黄芪多糖的分离纯化。黄芪多糖提取液浓缩后用sevag法除蛋白,再用蒸馏水透析,经醇沉后的黄芪多糖,冻干后备用。先进行DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析,再做Sephadex G-200凝胶柱层析,然后将所得组分进行高效液相色谱检测。
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