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研究背景：类风湿关节炎(RA)是一个病因未明的,累及周围关节为主的系统性、炎症性的自身免疫性疾病。抗原多肽通过抗原提呈细胞使T、B细胞活化,进而导致免疫球蛋白、细胞因子、以及氧自由基等炎性介质增多,引起滑膜增生、血管翳形成、骨和软骨的破坏,最终致不可逆的骨和关节实质性破坏。临床主要表现为慢性、对称性和进行性关节炎。类风湿关节炎发病病因复杂多样,机制也不明确。并没有一个明确的早期诊断指标。胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis, CIA)模型是通过II型胶原(type Ⅱ collagen,CⅡ)免疫大鼠,诱导产生多关节炎症,与临床类风湿关节炎(RA)极为相似,因而被广泛应用于RA的发病机制、免疫治疗等方面的研究,是国内外公认的RA的理想动物模型。目的：通过建立CIA大鼠模型,系统地观察HCgp39短肽(265-273)作为特异性抗原刺激物对CIA大鼠体外脾淋巴细胞激活的影响,检测细胞上清及血清中IL-17等细胞因子的分泌情况,并与CIA大鼠关节炎症评分、病理评分、血清COMP水平、抗HCgp39抗体进行相关性研究,探讨HCgp39在CIA大鼠模型中的诊断和鉴别诊断的价值,为将来HCgp39在RA病情活动相关性判断价值上做贡献。方法：选用雄性SD大鼠建立CIA大鼠模型,并分别在建模期间1-8周后分离、培养大鼠脾淋巴细胞,检测HCgp39、抗HCgp39抗体、免疫复合物对淋巴细胞增殖反应的影响,酶联免疫吸附法检测细胞上清及血清中IFN-γ、IL-4、IL-17等细胞因子的分泌情况,同时建立量子点标记流式细胞术检测HCgp39/AST细胞的方法,并观察大鼠一般情况、关节炎症评分、病理评分,并进行相关分析。结果：1、在首次免疫后的第10天即首个炎症高峰,模型组关节红肿明显而对照组无,模型组滑膜明显增厚,滑膜下炎性细胞浸润,血管翳增多。模型组大鼠软骨寡聚基质蛋白(COMP)表达水平升高,与对照组相比有显著统计学差异(P均<0.01)。HCgp39抗原可以诱导HCgp39抗原特异性T细胞(HCgp39/AST)的增殖反应,增殖指数明显高于FLAG肽刺激组和实验对照组(P<0.01或P<0.05),并与CIA建模时间、病理评分及抗HCgp39抗体产生水平显著相关(P＜0.01或P＜0.05)。2、模型组大鼠血清IFN-γ、IL-17、TGF-β的分泌水平显著升高,与对照组相比差异有统计学意义(P均＜0.01),而IL-4的分泌水平较实验对照组降低。在HCgp39抗原肽刺激后的细胞培养上清中,IFN-γ、IL-17、TGF-β的分泌水平与实验对照组比较显著增高,差异有统计学意义(P均＜0.01),而与血清中检测结果不同的是,IL-4的分泌水平较对照组高。经HCgp39刺激后抗原特异性T细胞产生的IFN-γ、IL-17水平与HCgp39/AST细胞增殖均呈显著正相关(P均＜0.01),但IL-4和TGF-β的产生水平与其未见相关性。3. HCgp39/AST细胞在CIA大鼠脾淋巴细胞中的百分率高于实验对照组(P均<0.01),该细胞群与特异性T细胞增殖(HCgp39刺激)及CIA大鼠炎症的发生关系密切,但与抗HCgp39抗体及其特异性免疫复合物诱导的T细胞增殖呈显著负相关关系。结论：CIA大鼠体内存在有针对HCgp39抗原引发的一系列自身免疫反应,包括在体外可诱导早期CIA大鼠淋巴细胞的异常增殖,早期抗HCgp39抗体的产生与一系列细胞因子(IFN-γ、IL-17、IL-4和TGF-β)的表达失衡等；研究还发现HCgp39/AST细胞与特异性T细胞增殖(HCgp39刺激)及CIA大鼠炎症的发生关系密切,抗HCgp39抗体与HCgp39抗原抗体复合物在参与T细胞的增殖活化过程中可能亦发挥重要作用。