植物乳杆菌ZDY2013与两歧双歧杆菌WBIN03对小鼠结肠炎缓解作用的研究

来源 :南昌大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Mafei19881016
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炎症性肠病已成为威胁全球人类健康的重要疾病之一,易复发,主要受遗传、环境、免疫和肠道菌群因素影响。益生菌可以改善机体肠道菌群结构,目前常用于预防、治疗或辅助治疗多种疾病。本文选取了分离自酸豆角的植物乳杆菌ZDY2013,和分离自婴儿粪便的两歧双歧杆菌WBIN03,通过构建H2O2诱导的氧化损伤HT-29细胞模型,研究植物乳杆菌ZDY2013和两歧双歧杆菌WBIN03对结肠癌细胞的抗炎症及抗氧化作用。结果表明,植物乳杆菌ZDY2013、两歧双歧杆菌WBIN03及其1:1混合菌作用于细胞后可显著提高细胞抗氧化能力(P<0.05)。其中,植物乳杆菌ZDY2013可以显著提高细胞上清液中的GSH-Px的活性(P<0.05),显著上调细胞SOD2(P<0.05)和GPX2的相对表达量(P<0.001);两歧双歧杆菌WBIN03可以显著提高SOD和GSH-Px的活性(P<0.05),显著上调SOD1的相对表达量(P<0.05);两菌混合作用可显著上调SOD1和GPX2的相对表达量(P<0.001)。三组益生菌组细胞较模型组细胞促炎症因子(IL-6)的相对表达量均显著降低(P<0.05),抑炎症因子(IL-10)相对表达量显著升高(P<0.05)。为进一步研究益生菌在体内的作用效果,本文选用4-5周龄的BALB/c小鼠,构建了DSS诱导的溃疡性结肠炎小鼠模型和TNBS诱导的克莱恩病小鼠模型。两种结肠炎小鼠在三组益生菌作用下,体重得到显著恢复,结肠组织炎症状况得到改善,血清中抗氧化酶的活性(SOD、GSH-Px、CAT)有所提高,结肠组织的抗氧化酶相关因子(SOD1、SOD2、GPX2和CAT)相对表达量升高。促炎因子TNF-α的相对表达量显著降低(P<0.05),抑炎因子IL-10的相对表达量显著升高(P<0.05),其中在溃疡性结肠炎小鼠实验中还发现核转录相关因子2(Nrf2)在益生菌作用下相对表达量均得到显著升高(P<0.05)。为深入研究益生菌对结肠炎小鼠肠道菌群的改善作用,本文通过16S rDNA测序技术检测溃疡性结肠炎小鼠粪便中的菌群变化。通过LefSe分析发现,植物乳杆菌ZDY2013处理可以提高小鼠肠道中Lactobacillus-animals的丰富度,两歧双歧杆菌WBIN03处理可以提高Lachnospiracea-bacterium-COE1的丰富度。综合菌群分析结果发现,三组益生菌对DSS诱导的溃疡性结肠炎小鼠肠道菌群的调节作用主要集中在厚壁菌门、拟杆菌门和变形菌门。以上研究表明,植物乳杆菌ZDY2013和两歧双歧杆菌WBIN03可通过调节结肠炎小鼠的肠道菌群多样性、提高机体抗氧化酶活性并调节免疫反应,达到缓解小鼠结肠炎症的效果。本研究为益生菌作为结肠炎的缓解辅助药物提供了理论依据。
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