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促分裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase,MAPK）级联参与了激素、生物与非生物胁迫以及细胞分化等多种植物信号转导。本实验利用MAPK基因编码的氨基酸序列的保守区域进行同源性搜索,克隆鉴定了一个编码水稻MAPK蛋白激酶的基因OsMPK4。OsMPK4基因位于水稻10号染色体上,由6个外显子和5个内含子组成。OsMPK4基因全长cDNA为1483bp,包含一个1131bp的开放阅读框,编码一个376个氨基酸组成的蛋白,预测分子量为42.8kDa。预测的OsMPK4蛋白具有MAPK蛋白典型的11个保守结构域,及磷酸化位点“TEY”模体。系统进化树分析表明,OsMPK4属于B组MAPK成员,在氨基酸水平上与ZmSIMK1（AAR11450）、AtMPK4（Q39024）和AtMPK5（S40471）的一致性分别为94.6%、85.6%和79.7%,但是与水稻其他已克隆的MAPK基因却只存在56%～74%的一致性,确定OsMPK4为水稻的一个新MAPK基因。 为了探明OsMPK4在植物信号传导途径中的功能,我们将OsMPK4基因编码区置于植物双元表达载体pCHF3中,CaMV35S组成型强表达启动子的下游,运用根癌农杆菌（Agrobacterium tumefaciens）介导的叶盘法转化烟草,经卡那霉素抗性筛选和PCR检测,前期获得21株T0代OsMPK4转基因植株,发现转基因植株较对照有些特别之处,获得10株转基因植株种籽。转基因植株的分子鉴定及其抗病性表型测试正在进行中。 为了研究OsMPK4蛋白的生化功能,我们构建了pRSETA-OsMPK4原核表达体系,并纯化获得了重组的OsMPK4融合蛋白,为进一步分析OsMPK4蛋白的生化活性奠定了基础。