双龙方干预骨髓间充质干细胞分化过程中代谢组学研究

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双龙方是由丹参和人参两味药材所组成的中药复方配伍,具有“益气养血、活血通脉”的功能,适用于治疗冠心病、心绞痛和心肌梗死等心血管疾病。骨髓间充质干细胞(MSCs)在一定条件之下定向分化为心肌细胞,对细胞移植治疗心肌梗死有重要的意义。本论文在代谢组学的层面上,研究中药复方双龙方对大鼠骨髓间充质干细胞的干预结果,寻找细胞代谢物在诱导过程中的变化。为此我们先对复方的组分配伍(总丹酚酸、人参总皂苷)及成分配伍(Sal B、Rb1)进行化学分析,通过HPLC/MS的方法确定了其中的11种化学成分,明确复方当中的化学组成。然后又采用了离子对色谱法进行分离,离子阱质谱仪作检测,建立起分析MSCs代谢物的HPLC/MS方法,筛选出30种细胞代谢物,包括了核苷酸类、氨基酸类和糖代谢类,对其中的28种进行定量,并作了方法学考察。在上述的基础上,进行了细胞代谢物组学研究。考察了干细胞在第0、10、20、30和35天的分化情况,比较空白组、5-aza诱导组、双龙方组分组和双龙方成分组之间的差别,得到了初步结果。双龙方组分组和5-aza诱导组中,有5种代谢物(AMP、Tau、ADP、Glu和Thr)在诱导第35天时浓度水平接近,说明这两个组具有相似疗效,与实验室前有的结果相符合。体现出中药复方配伍的必要性和科学性,在一定程度上具有与西药相似的治疗效果。结果对双龙方干预MSCs分化中代谢物的变化情况提供了参考。
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