论文部分内容阅读
玄参为玄参科(Scrophulariaceae)植物玄参(Scrophularia ningpoensis Hemsl.)的干燥根,是著名的“参类”传统中药,也是我国特有植物,原主产于浙江省,为“浙八味”中药之一,由于产业的转移,浙江省种植面积不断缩水,出现萎缩。镇坪是陕西南部山区县城,毗邻重庆,是典型的亚热带气候,多年来,当地群众大量种植玄参,年产量已达400万吨,因为品质优良,已远销东南亚各国及日本、韩国。镇坪成为我国玄参第一种植大县,形成“镇坪玄参”药材品牌。为了比较镇坪产玄参与浙江产玄参内在质量的差异,本文对镇坪玄参进行了化学成分和生物活性研究,并对玄参叶进行了初步开发利用。1镇坪产玄参化学成分研究以镇坪产鲜玄参为实验材料,用75%乙醇渗漏提取,采用分步萃取法,正相硅胶柱色谱和高效液相制备等多种分离手段从中分离得到11种化合物,并运用波谱(UV、IR、MS、13C NMR、1H NMR、HMBC、HMQC、H-HCOSY)手段,结合理化常数,鉴定了他们的结构,分别属于环烯醚萜苷、苯丙素苷和皂苷类等,其中2个化合物为首次从玄参根中分离得到。2玄参中环烯醚萜苷的定量分析采用LC-DAD-MS法,同时测定了玄参样品中的5种环烯醚萜苷的含量。发现鲜玄参直接烘干品中环烯醚萜苷的含量显著大于市售玄参饮片;首次采用高效毛细管电泳(HPCE)法,考察了缓冲溶液pH值,浓度,添加剂,电压等参数对玄参中四种环烯醚萜苷迁移时间影响,该方法可使玄参中的四种环烯醚萜苷类成分桃叶珊瑚苷、哈帕苷、6-O-甲基梓醇和哈帕俄苷在45 min得到良好效果;采用不同烘干温度(40℃-120℃)制备玄参样品,使用HPLC考察了烘干温度对玄参中四种坏烯醚萜类成分的含量影响,实验发现100℃烘干新鲜玄参可以最大限量的保留玄参中的环烯醚萜苷类化合物。3镇坪产玄参的生物活性与应用采用滤纸片和96孔板法,通过体外抗菌实验考察了玄参提取物和玄参中的化合物对8种菌株的抗菌活性,实验发现玄参叶提取物和scrokoelziside A对乙型溶血性链球菌有较好的抗菌活性,玄参叶总提取物的最低抑菌浓度和最低杀菌浓度分别为7.81和31.25 mg·mL-1,scrokoelzisideA为1.55和6.25 mg·mL-1;以体外抗氧化体系为模型,用清除有机自由基DPPH法考察了玄参提取物及玄参中单体化合物的抗氧化活性,结果显示玄参叶中的黄酮类化合物对DPPH自由基有较好的清除作用,nepitrin的活性几乎和Vc相当:实验同时研究了玄参中的6-O-甲基梓醇在家兔体内的药代动力学,分析表明其静脉注射给药后在家兔体内的药代动力学符合二房室模型:另外,通过摇瓶法测定了玄参中四种环烯醚萜苷的油水分配系数。首次从化学成分和药理活性两方面比较了浙江产“道地玄参”和镇坪产“异地引种玄参”。结果表明本实验研究的两地玄参饮片的化学成分种类几乎没有差别,而环烯醚萜苷类成分的含量,镇坪玄参从总体上高于浙江产玄参,抗炎镇痛实验进一步表明本实验研究的陕西镇坪产玄参的抗炎、镇痛活性略优,可能是由于气候、环境和加工等的不同所引起,研究结果证明了陕西镇坪玄参的优良品质,为其大面积种植提供了科学依据。