核桃多肽具有抗炎抗氧化的生物活性。本研究基于实验室前期筛选出具有强抗氧化活性的核桃肽EVSGPGLSPN、WEKPPVSH、LPLLR,利用氧化损伤模型和细胞炎症模型,研究其对原代星形胶质细胞和小胶质细胞的保护作用和机制,具体结果如下:1.通过采集小鼠大脑皮层,经过剪碎,胰蛋白酶和DNA酶消化,差速贴壁纯化,无血清饥饿处理,恒温摇床纯化,得到小鼠原代星形胶质细胞,免疫荧光法鉴定阳性细胞可达95%。2.利用400μM H₂O₂处理小鼠星形胶质细胞,建立氧化损伤模型,考察核桃肽对氧化应激的缓解作用。实验结果表明,核桃肽EVSGPGLSPN、WEKPPVSH和LPLLR均能降低细胞中ROS含量（P<0.01）,在50μM时分别降至模型组的69.36%、39.78%和58.51%,并显著提高细胞内总抗氧化水平以及超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）的活力（P<0.01）。3.通过LPS刺激BV2细胞,建立BV2小胶质细胞炎症模型,考查核桃肽对炎症因子的抑制作用。实验结果表明,核桃肽EVSGPGLSPN、WEKPPVSH和LPLLR对炎症损伤的BV2细胞有较好的保护作用,其中WEKPPVSH活性最高,当浓度达到50μM时,NO分泌量减少至模型组的41.2%。IL-1β、IL-6、TNF-α的分泌均显著降低（P<0.01）,分别下降到模型组的34.32%、63.43%、40.41%。4.通过免疫荧光法和蛋白印记法研究WEKPPVSH对BV2细胞NF-κB信号通路上关键蛋白的影响。免疫荧光实验结果显示,WEKPPVSH可降低p65蛋白的核转运;蛋白印记实验结果显示,WEKPPVSH通过抑制IκB-α和p65蛋白的磷酸化,进而下调下游炎症酶iNOS、COX-2的表达。5.利用蛋白印记法分析WEKPPVSH对BV2细胞Nrf2信号通路关键蛋白的影响。结果表明WEKPPVSH显著上调Nrf2蛋白的表达（P<0.05）,进而显著上调下游抗氧化酶HO-1、SOD和CAT的活性（P<0.01）,降低细胞内ROS水平（P<0.01）。6.通过高效液相色谱法测定核桃肽的稳定性。实验结果证明核桃肽EVSGPGLSPN的pH稳定性和消化酶耐受性良好,对高温稳定性较差,80°C开始降解;WEKPPVSH具有良好的热稳定性和pH稳定性,对胃蛋白酶具有较高的耐受性,但被胰蛋白酶水解;LPLLR的热稳定性、pH稳定性和消化酶抗性均良好。