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目的: 探索高迁移率族蛋白-1(high mobility group box-1 protein,HMGB1)参与小鼠卵巢移植同种排斥反应的作用研究,希望寻找有效的作用靶点,为解决今后的异体卵巢移植排斥反应提供思路。 方法: (1)第一部分:在肾被膜下建立小鼠卵巢移植排斥反应模型,分为同种移植组(Allo组)、同系移植组(Syc组)、空白对照组(C57组):Allo组:Barb/c鼠为供体,C57BL/6鼠为受体;Syc组:供、受体均为C57BL/6鼠,空白对照为未移植的C57BL/6鼠。移植手术后1周处死小鼠,取血清、卵巢、肾脏、脾脏组织。运用组织形态学、免疫组织化学、免疫印迹等方法检测移植物的组织形态学改变及HMGB1的含量变化。 (2)第二部分:建立阻断HMGB1对小鼠卵巢移植同种排斥反应的影响模型,分组:甘草酸苷(glycyrrhizin,GL)治疗组:腹腔注射GL 200ul/只;生理盐水(normalsaline,NS)治疗组:腹腔注射NS 200ul/只。给两组小鼠分别腹腔注射甘草酸苷(2.5mg/ml)和生理盐水,分别于移植前一天,移植后第一天,第三天,第五天,第七天,总共5次治疗,每次200 ul/只。移植手术后1周处死小鼠,取血清、卵巢、肾脏、脾脏组织。同样运用组织形态学、免疫组织化学等方法检测阻断HMGB1后移植物的组织形态学改变及HMGB1的含量变化。 结果: (1)成功建立小鼠卵巢肾被膜下移植排斥反应模型,组织形态学结果说明卵巢移植后卵泡结构被破坏,间质见淋巴细胞和中性粒细胞浸润,周围有纤维组织形成,而且同种移植组比同系移植组变化更明显。 (2)免疫组化检测结果说明同系移植组见HMGB1主要表达在细胞核内,而同种移植组,HMGB1可表达于细胞核,胞浆及细胞外,表明移植物内HMGB1可以由细胞核移动到胞浆甚至胞外。Western Blot检测结果显示卵巢移植后移植物局部的HMGB1蛋白表达水平增高,而同种移植组HMGB1蛋白的表达高于同系移植组(p<0.05)。 (3)阻断HMGB1治疗后移植物局部HMGB1表达减少,可改善卵巢移植排斥反应的程度。 结论: (1)HMGB1参与小鼠卵巢移植排斥反应的发展,其增高的程度可以反映排斥反应的严重程度。 (2)阻断HMGB1对卵巢移植同种排斥反应有保护作用。 (3)HMGB1水平可能成为异体卵巢移植预后评价指标以及新的治疗靶点。