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【目的】应用实时荧光定量PCR (RT-QPCR)技术探测CK-19 mRNA在非小细胞肺癌微转移发生时的表达量,并讨论采用RT-QPCR技术相对定量检测CK-19mRNA在NSCLC中的表达是否可作为诊断NSCLC微转移的实验方法并寻找出该方法的最佳灵敏度和准确度以及在该灵敏度和准确度的情况下的临界值。[方法](1)采用吸附柱法抽提113例非小细胞肺癌患者外周血中的总RNA,应用RT-PCR技术检测CK-19 mRNA的表达并评估其与临床病理特征的相关性,同时以50例肺良性疾病患者及50例健康人的外周血作为对照组,以GAPDH为内参照,对目的基因进行检测和统计学分析,选取出合适的NSCLC外周血标本进行下一步实验；(2)在第一部分的基础上利用实时荧光定量PCR技术,以GAPDH为内参照,采用相对定量的方法,扩增44例非小细胞肺癌患者外周血中CK-19 mRNA,通过绘制柱形图直观的44例NSCLC患者外周血中CK-19mRNA的相对量和受试者工作特征曲线(Receiver operating characteristic curve, ROC曲线)并测定曲线下面积(Area under the ROC curve, AUC),对试验结果进行分析,确定NSCLC发生微转移时CK-19 mRNA在临床诊断中的诊断试验效果临界值(cut off value)。[结果] (1)肺癌组和参照组中CK-19 mRNA阳性表达率分别为38.94%(44/113)、1%(1/100),差异有统计学意义(P<0.01),且CK-19 mRNA阳性表达在非小细胞肺癌中的表达与肿瘤分期和和分化程度有关,而与是否吸烟、性别、病理类型无关；(2)利用ROC曲线分析CK-19 mRNA荧光定量的结果,实验效果的临界值为0.2357,灵敏度为95.45%,准确度为77.27%；AUC为0.896。[结论](1)利用高灵敏度的RT-PCR技术探测NSCLC患者外周血中的微转移癌细胞是可行的；(2)CK-19 mRNA可作为检测NSCLC患者外周血微转移的相对特异的分子标记物；(3)应用实时荧光定量PCR法对NSCLC患者外周血中的CK-19 mRNA的进行相对定量分析显示其可考虑作为NSCLC患者发生微转移时的一个参考指标,但还需要的大样本长期追踪观察去证实。