分泌型卷曲相关蛋白家族成员在多囊卵巢综合征患者卵丘颗粒细胞中的基因表达分析

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目的探讨部分分泌型卷曲相关蛋白(sFRPs)家族成员基因在多囊卵巢综合征(PCOS)患者与非PCOS患者不同成熟度卵母细胞对应的卵丘颗粒细胞上的基因表达差异。方法收集27例接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)助孕治疗的不孕女性(其中PCOS患者11例,非PCOS患者16例),采用标准长方案促排卵,经阴道超声引导下穿刺取卵后,采用机械法剥离每个卵母细胞的卵丘颗粒细胞,共获得197枚卵丘-卵母细胞复合体(PCOS患者97枚,非PCOS患者100枚),机械剥离每个卵母细胞周围的部分卵丘颗粒细胞,根据卵母细胞成熟度不同,将对应的卵丘颗粒细胞分为4组:非PCOS患者成熟卵母细胞的颗粒细胞组(CCN-XI=MII),非PCOS患者未成熟卵母细胞的颗粒细胞(CCN_N-MI+GV),PCOS患者成熟卵母细胞的颗粒细胞组(CCP_MII)和PCOS患者未成熟卵母细胞的颗粒细胞(CCP-MI+GV)。通过实时荧光定量PCR反应(qRT-PCR)方法技术检测部分sFRPs家族基因成员(sFRPl, sFRP2, sFRP3, sFRP4, sFRP5)在PCOS及非PCOS患者不同成熟度卵母细胞相应的卵丘颗粒细胞上的表达情况。结果(1)PCOS患者中,sFRP4在未成熟卵母细胞的颗粒细胞中的表达显著高于其在成熟卵母细胞的颗粒细胞中的表达,在CCP-MI+GV组sFRP4表达高于CCP-MⅡ组[(7.80±1.21)vs(1.00±0.00)](P<0.05);(2)sFRPs家族成员中sFRP4和sFRP5在非PCOS患者不同成熟度卵母细胞的卵丘颗粒细胞中表达变化明显,CCN-MI+GV组中的表达量明显都高于CCN-MⅡ。组[sFRP4(7.04±1.30) vs(1.00±0.00)](P<0.05)和[sFRP5(2.84±0.73) vs (1.00±0.00)](P<0.05);(3)sFRP4的表达在PCOS及非PCOS患者间成熟卵母细胞对应的颗粒细胞组间无显著差异。结论sFRP4在卵丘颗粒细胞上的表达与卵母细胞的成熟度相关,其表达量随着卵母细胞的核成熟而逐渐降低。而且,在非PCOS患者中,sFRP5的这种表达变化亦与卵母细胞的核成熟度相关。
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