工频磁场对小鼠卵母细胞减数分裂成熟的影响

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背景:近年来,随着中国经济的发展和社会的进步,环境中各种有害因素的种类和数量也随之增长。当前出生缺陷率居高不下、不孕不育率逐年上升的现象提示我们,环境对生殖安全的干扰已日益明显、令人担忧。人为制造的工频磁场在生活和职业环境中无处不在,且暴露水平日益增高,已成为影响生殖安全的重要理化因素之一。流行病学研究提示工频磁场可能升高流产的危险性,并且与子宫内胚胎的次优生长、先天畸形、早期胚胎丢失以及死产等不良生育结局有关。实验研究初步显示工频磁场可能通过影响细胞超微结构、干扰卵泡发生过程、减少排出的囊胚数等机制减弱雌性的生殖力。而工频磁场对单个卵母细胞的影响却少有报道。考虑到卵母细胞作为女性生殖细胞所具有的重要生理作用,考察工频磁场暴露对体外单独体外培养的卵母细胞的生物学效应将对女性生殖系统生殖毒性评价具有重要意义。目的:研究工频磁场对体外培养的小鼠卵母细胞减数分裂成熟的影响。方法:从21天ICR雌鼠获取卵母细胞。将卵母细胞分别暴露于2mT工频磁场4h、12h和24h,每个时间点均设置一一对应的假暴露组。暴露结束后,GV期卵母细胞采用免疫荧光法检测DNA损伤情况。将GV期卵母细胞继续培养,4h后和12h后镜下分别统计GVBD率和PB1排出率。排出第一极体的MII期卵母细胞用染色体铺片实验和免疫荧光法观察其染色体数目、形态以及纺锤体的形态,并进行统计。用A23187和CHX联合处理MII期卵母细胞,统计孤雌激活率从而评估卵母细胞进一步发育的潜能。结果:与假暴露组比较,工频磁场暴露后,yH2AX平均细胞焦点数和阳性细胞率均没有显著性差异;工频磁场未对GVBD率及PB1排出率、染色体数目、染色体的排列与纺锤体的形态产生影响;暴露组和假暴露组的孤雌激活率无统计学差异。结论:在本实验条件下,工频磁场对小鼠卵母细胞体外减数分裂成熟无影响。
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