深色有隔内生真菌培养条件的优化及铅吸附特性的研究

来源 :西北农林科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:linyi870821
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本研究以分离自铅锌矿区优势植物沙打旺(Astragalus adsurgens)根部的沙门外瓶柄霉(Exophiala salmonis)、甘瓶霉(Phialophora mustea)、菊异茎点霉(Paraphoma chrysanthemicola)和枝状枝孢菌(Cladosporium cladosporioides)4种具有较强耐铅性的深色有隔内生真菌(Dark septate endophytes,DSE)为试验材料,对4种真菌的纯培养条件进行优化,研究4种真菌黑色素的合成情况和真菌非活性菌丝对铅的吸附能力,从中筛选出铅吸附能力最强的菌株并研究其吸附特性。研究结果如下:4种真菌在固体培养时沙门外瓶柄霉、甘瓶霉和菊异茎点霉的最佳碳源均是葡萄糖,枝状枝孢菌的是乳糖;沙门外瓶柄霉、甘瓶霉和枝状枝孢菌的最佳氮源均是硝酸钠,菊异茎点霉的是胰蛋白胨;沙门外瓶柄霉最适宜生长的碳氮源组合是葡萄糖和硝酸钠或尿素,枝状枝孢菌的是葡萄糖和胰蛋白胨,甘瓶霉和菊异茎点霉的均是葡萄糖和蛋白胨。4种真菌在液体培养时甘瓶霉、菊异茎点霉和枝状枝孢菌的最佳碳源均是可溶性淀粉,沙门外瓶柄霉的是葡萄糖;沙门外瓶柄霉、甘瓶霉、菊异茎点霉和枝状枝孢菌的最佳氮源分别是磷酸氢二铵、草酸铵、蛋白胨和硝酸铵;枝状枝孢菌和甘瓶霉最适生长的碳氮源组合均是可溶性淀粉和硝酸铵,沙门外瓶柄霉的是葡萄糖和硝酸钠,菊异茎点霉的是可溶性淀粉和胰蛋白胨。固体和液体培养时,4种真菌的最适生长温度均为25℃,属于中温菌;沙门外瓶柄霉和菊异茎点霉的最适生长pH分别为5.0和7.0,甘瓶霉和枝状枝孢菌的均为6.0。液体培养时,除甘瓶霉的最适培养转速为100 rpm外,剩余3种真菌的均为120 rpm。液体培养时,添加三环唑能使沙门外瓶柄霉和枝状枝孢菌的培养液颜色变为红棕色,而对甘瓶霉和菊异茎点霉的培养液颜色几乎无影响;添加2-巯基苯并咪唑对4种真菌的培养液颜色几乎均无影响。4种真菌对两种抑制剂表现出不同的耐药性,抑制剂的存在会阻碍它们的生长,减少生物量。沙门外瓶柄霉和枝状枝孢菌通过1,8-二羟基萘酚(DHN)途径合成黑色素,而甘瓶霉和菊异茎点霉既不合成DHN类黑色素,也不合成L-3,4-二羟基苯丙氨酸(L-DOPA)类黑色素。比较4种真菌的铅吸附能力,结果表明被测4种真菌中,非活性菌丝的铅吸附能力由强到弱依次为枝状枝孢菌、菊异茎点霉、沙门外瓶柄霉和甘瓶霉。当吸附时间为60 min时,它们对铅的去除率和吸附能力依次为94.9%和19.5 mg/g、61.6%和12.7 mg/g、56.4%和11.6 mg/g、48.6%和10.0 mg/g。对铅吸附能力最强的枝状枝孢菌非活性菌丝铅吸附特性测定,其非活性菌丝对铅的吸附过程受pH、初始金属浓度、吸附时间、吸附剂剂量、温度、转速及吸附剂预处理方法的显著影响,最佳的单因素吸附条件分别为pH 5.0、初始金属浓度150μg/mL、吸附时间120 min、吸附剂剂量3 g/L、温度25℃、转速180 rpm,该条件下的铅吸附能力为40.8 mg/g。不同预处理方法对枝状枝孢菌非活性菌丝的吸附能力影响显著:以MMN为培养基时生长10 d~13 d的菌丝吸附效果较好;适宜烘干温度和时间分别为80℃和12 h;商业洗衣粉和NaOH处理分别使吸附能力提高36.3%和26.3%,且前者处理效果优于后者(p<0.05);枝状枝孢菌的黑色素合成被三环唑抑制后,对铅的去除率和吸附吸附能力分别比对照降低了2.94%和2.91%。
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