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内生真菌是一类数量庞大的微生物资源,其代谢产物多样性程度高,并且具有抗菌、抗氧化、抗肿瘤、免疫抑制等多种生物活性,是一个寻找天然活性物质的巨大宝库。本论文以抗菌活性和抗氧化活性为导向,探索红树林植物海莲内生真菌中具有生物活性的代谢产物。主要内容包括:海莲内生真菌的分离和鉴定;抗菌、抗氧化活性菌株的筛选;活性菌株产物的分离。概括如下:(1)从海莲根、茎、叶、花、胚轴中共分离得到96株内生真菌,通过形态学初步筛选得到67株菌株,再通过分子鉴定,结果显示分离得到的内生真菌分属于10目,12科,13属,20种,其中间座壳属Diaporthe sp.和拟盘多毛孢属Pestalotiopsissp.是海莲内生真菌的优势种群。(2)采用四种培养基对分离得到内生真菌进行小量发酵培养,用乙酸乙酯提取出发酵产物进行抗菌、抗氧化活性筛选,并测定出最小抑菌浓度(MIC)和清除自由基半抑制浓度(IC50)。得到如下结果:抗菌活性初筛共筛出10株内生真菌在不同培养基的产物对大肠杆菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、铜绿假单胞菌和白色念珠菌五种指示菌的生长具有抑制性;抗氧化活性筛选出15株内生真菌的不同培养基产物对DPPH自由基和ABTS自由基具有清除能力;结合复筛测得最小抑菌浓度和清除自由基半抑制浓度最终确定以内生真菌Pestalotiopsis mangiferae作为研究对象,进行代谢产物的分离。(3)经过扩大培养,采用硅胶柱层析、C18柱层析、葡聚糖凝胶柱层析等多种分离手段从海莲内生真菌Pestalotiopsis mangiferae乙酸乙酯提取物中分离得到5个单体化合物。利用多项波谱技术(EI-MS、1H-NMR、13C-NMR等)对5个化合物进行结构鉴定,分别是 stigmast-4-en-3-one、3-Heptadecyl-5-methoxy-phenol、Ergosta-4,6,8(14),22-tetraen-3-one、Stigmastanol trans-Ferulate、 5,8-epidioxy-5α,8α-ergosta-6,22E-dien-3β-ol。其中,3-Heptadecyl-5-methoxy-phenol 能够清除 ABTS 自由基,IC50值<1.7mg/mL,具有一定的抗氧化性。