葡萄籽主要成分及高纯度低聚原花青素制备研究

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本文以酿酒后葡萄籽为原料,系统地研究了葡萄籽主要成分的提取工艺,以期为实现葡萄籽综合利用和深加工提供参考。实验结果如下:以沸程60-90℃的石油醚为溶剂,提取葡萄籽油的最佳工艺参数为:提取时间3h,提取温度84℃,提取液固比9:1。在此条件下对葡萄籽油脂的提取率达14.5%;GC-MS的分析结果指出:葡萄籽毛油由7种脂肪酸组成,主要脂肪酸及其含量分别为亚油酸53.50%,棕榈酸25.94%,硬脂酸13.86%;脱脂葡萄籽原花青素提取工艺的最佳参数为:乙醇浓度65%,液固比6:1,每次提取3h,提取2次。最佳参数下,原花青素提取率可达5.7%,纯度可达33.1%。碱提酸沉得葡萄籽蛋白,采用双缩脲法测得葡萄籽蛋白含量为8.92%。聚酰胺树脂分离原花青素粗提物的最佳参数为:pH值7,上样流速2mL/min,上柱浓度为1.1mg/mL,洗脱剂为60%丙酮-水溶液,洗脱体积为3倍柱体积。分析型液相色谱纯化二聚体的最佳工艺参数为:填料ODS-AQ;粒径5μm;流速1mL/min;进样量20μL;柱尺寸4.6×250mm;检测分流比5:1;检测波长280nm;柱温25℃;流动相A:丙酮,流动相B:超纯水;时间程序0-10min:A10%-10%;10-60min:A10%-25%;60-120min:A25%-35%。制备型液相色谱纯化二聚体的最佳工艺参数为为:填料ODS-AQ;粒径40μm;流速500mL/min;进样量400mL;柱尺寸20×150cm;检测分流比5:1;检测波长280nm;柱温25℃;流动相A:丙酮,流动相B:超纯水;时间程序0-10min:A10%-10%;10-60min:A10%-25%;60-120min:A25%-35%。最后,通过液质联用以及13C-NMR、1H-NMR核磁图谱对高纯度原花青素进行了结构鉴定,确定其为葡萄籽原花青素二聚体B2。
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