【摘 要】
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该文采用PCR-两段扩增法分离得到人碱性成纤维细胞生长因子(hbFGF)的基因并将这一基因成功克隆到表达质粒PT3C中,hbFGF基因被插入强调控的T7启动子下游,并在hbFGF上游翻译偶
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该文采用PCR-两段扩增法分离得到人碱性成纤维细胞生长因子(hbFGF)的基因并将这一基因成功克隆到表达质粒PT3C中,hbFGF基因被插入强调控的T7启动子下游,并在hbFGF上游翻译偶联噬菌体基因S10增强天然hbFGF基因的表达效率.经IPTG诱导,hbFGF蛋白可在选择的宿主菌BL21(DE3)中获得15%的高效表达.Western印迹分析证明该蛋白可被hbFGF特异性单克隆抗体所识别.选用阳离子交换柱和肝素亲合层析柱两步层析纯化可获得纯度较高的hbFGF纯品.进一步研究证明该纯品hbFGF蛋白能有效促进3T3细胞增殖,并具有稳定的hbFGF活性.
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