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目的 对动物鼻式气溶胶暴露装置进行性能评价,并验证装置消毒灭菌效果,为生物安全实验及感染性活动提供安全保障。方法 选择对人不致病的大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)和鼠肝炎病毒(Mouse hepatitis virus,MHV)分别代表细菌、病毒为模式微生物,通过动物鼻式气溶胶暴露装置产生E.coli气溶胶和MHV气溶胶,评价气溶胶产生效果及活力。分别用75%乙醇气溶胶和3%过氧化氢气溶胶对系统消毒,评价消毒灭菌效果。分别采集暴露舱内、设备连接处易发生泄露部位及消毒后气溶胶。对E.coli气溶胶采集样本进行微生物培养及菌落计数;对MHV气溶胶采集液提取RNA,qRT-PCR检测样本中病毒RNA。结果 装置产生的E.coli气溶胶颗粒中值直径为(1.27±0.61)μm,暴露舱内采样液涂板有菌落生长,置于暴露舱不同端口的NC膜上菌落数无显著性差异,易泄露处的沉降平皿及消毒后的采样平皿上均无菌落生长。暴露舱内采样液中的MHV病毒RNA为阳性,易发生泄露处及消毒后采样液中病毒RNA为阴性。结论 动物鼻式气溶胶暴露装置能正常运行,产生(1.27±0.61)μm的气溶胶;运行过程中暴露舱各端口有气溶胶通过并分布均匀,气密性好;消毒灭菌效果可达100%。这为装置安全有效地应用于高致病性病原微生物感染动物实验提供依据。目的 通过动物鼻式气溶胶暴露装置模拟流感病毒的自然感染途径,建立甲型H1N1流感病毒气溶胶感染小鼠模型,并与H1N1滴鼻感染小鼠模型比较。方法 将BALB/C小鼠随机分为气溶胶组、滴鼻组和对照组。气溶胶组小鼠吸入H1N1病毒气溶胶,滴鼻组小鼠滴鼻接种H1N1病毒液,对照组小鼠吸入MEM培养基气溶胶。分析小鼠感染后14天内的体重变化率及存活率,于感染后3 d、5 d、7d、9d解剖小鼠,观察组织大体形态,对脏器进行病毒滴度、病理及细胞因子检测。结果 气溶胶组小鼠感染后,4 d出现临床症状,5 d出现明显肺病变,7 d体重迅速下降,7-9天为病毒在肺中复制高峰期,出现支气管上皮细胞增生(滴鼻组未出现);滴鼻组小鼠感染后,2d内出现临床症状,3d发生明显肺病变、体重迅速下降,3-5 d为病毒在肺中复制高峰期。气溶胶组小鼠感染后肺叶病变较滴鼻组更为弥漫、均匀,其发病进程、肺病变进程均较滴鼻组缓慢、延后,相关促炎症细胞因子及趋化因子水平均显著增加。结论 本实验通过鼻式气溶胶暴露装置模拟自然途径,成功建立甲型H1N1流感病毒气溶胶感染小鼠模型,与H1N1滴鼻感染小鼠模型相比,其感染方式及感染后肺病变特征更接近人类,可作为滴鼻小鼠模型的补充,为更好的研究流感发病机制、评价相关药物及疫苗等提供参考。目的 通过动物鼻式气溶胶暴露装置模拟气溶胶途径,对hDPP4转基因小鼠进行MERS-CoV气溶胶感染,并与传统滴鼻小鼠进行比较。方法 DPP4转基因小鼠随机分为气溶胶组、滴鼻组、气溶胶对照组、滴鼻对照组。气溶胶组小鼠吸入MERS-CoV气溶胶,滴鼻组小鼠滴鼻接种MERS-CoV,气溶胶对照组小鼠吸入DEME气溶胶,滴鼻对照组小鼠滴鼻接种DMEM。分析感染后14 d内小鼠体重变化率及存活率,在3、5、7、9 d解剖小鼠,观察组织大体形态,进行病毒载量、病理检测、免疫组化分析及细胞因子检测。结果MERS-CoV气溶胶感染小鼠后潜伏期为5-7d,7d出现持续体重快速下降及明显肺病变,逐步发展至中度弥漫性肺炎甚至死亡,7-9 d为病毒在肺中复制高峰期;MERS-CoV滴鼻感染小鼠后1d出现临床症状,体重持续快速下降,3d肺病变显著,3-5 d为病毒在肺复制高峰期,5 d内存活率为0%。两组小鼠肺中均检测到病毒抗原表达,相关促炎症细胞因子及趋化因子水平均显著增加。MERS-CoV气溶胶感染后,小鼠发病进程、肺病变进程、病毒复制进程均比滴鼻感染小鼠延后。结论 通过动物鼻式气溶胶暴露装置产生MERS-CoV气溶胶,成功感染hDPP4转基因小鼠,其与滴鼻感染小鼠均模拟临床弥漫性肺炎症状。MERS-CoV气溶胶感染小鼠模拟临床气溶胶传播途径,其感染后的发病进程及肺病变进程更接近临床方面。