野油菜黄单胞菌野菜致病变种（Xcc）是一种能在世界范围内引起十字花科植物致病的革兰氏阴性细菌，其显著特征是能产生胞外多糖（EPS）。胞外多糖一直被认为是Xcc的致病因子之一，同时，由于其特殊的理化性质而被广泛应用于工业生产，因而对胞外多糖生物合成机理的研究在不断深入。本研究中，我们利用转座子Tn5gusA5随机插入诱变Xcc野生型菌株8004，构建了含17，280株突变体的Xcc突变体库。通过热不对称嵌套式PCR（TALL—PCR）和测序确定了转座子Tn5gusA5插入在Xcc基因组中的位置。通过平板检测的方法，在含2％葡萄糖的NYGA平板上从突变体库中筛选到17株胞外多糖缺陷突变体。根据其菌落形态特征，将这些突变体分为3类。致病性检测结果表明，13株突变体丧失了致病力，3株突变体致病力明显降低，而另外2株突变体仍具有与野生型8004相同的致病力。在这17株胞外多糖缺陷突变体中，14株突变体中被突变的ORF的注释功能与胞外多糖的产生相关，而另外3株被突变的ORF与胞外多糖的产生的关系尚不清楚。为了验证这3个ORF与胞外多糖的产生有关，我们成功地构建了这3个ORF的缺失突变体。结果表明Xcc₁14缺失突变株的表型与相应ORF的Tn5插入突变株的表型一致，表现为胞外多糖缺陷，而另外两个缺失突变株与野生型8004一致，未表现出胞外多糖缺陷。Xcc₁14长756bp，通过NCBI中的blast搜索，结果表明其编码产物与一种跨膜蛋白具有较高的同源性，推测可能与多糖的胞外运输有关。