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目的：本实验利用依托泊苷(VP-16)作用于体外培养的人肺腺癌A549细胞,探讨低浓度的VP-16是否能诱导A549细胞衰老；通过检测磷酸化Rb蛋白、Mdm2蛋白的表达水平和细胞周期分布,探讨Mdm2-Rb信号通路在细胞衰老中的作用,以深入低剂量节律(LDM)化疗机制的研究。方法：将A549细胞分为4组：对照组(单细胞悬液+培养基)、实验1组(单细胞悬液+含1μMVP-16的培养基)、实验2组(单细胞悬液+含5μMVP-16的培养基)、实验3组(单细胞悬液+含25μMVP-16的培养基)。各组细胞培养48小时后分别进行噻唑蓝(MTT)比色试验,观察VP-16对人肺腺癌A549细胞增殖的影响；细胞化学方法检测衰老相关-β-半乳糖苷酶的活性；流式细胞术检测VP-16对人肺腺癌A549细胞周期分布的影响；免疫细胞化学方法检测磷酸化Rb蛋白和Mdm2蛋白的表达。结果：①不同浓度的VP-16(OμM、1μM、5μM、25μM)作用于A549细胞48小时后,对照组细胞生长旺盛,呈丛簇状排列,细胞呈长梭形或多边形,细胞形态饱满,胞质丰富,胞核居于细胞中央;实验1组细胞生长受到轻微抑制,与对照组相比细胞形态无明显改变；实验2组细胞多散在或呈小堆排列,细胞皱缩呈圆形、卵圆形或多角形,或升出伪足,胞质减少；实验3组细胞生长受到明显的抑制,部分细胞变圆、浮起,活细胞形态与对照组相比无明显改变。②不同浓度的VP-16(0μM、1μM、5μM、25μM)作用于A549细胞48小时后,随着浓度的增大细胞的增殖抑制率逐渐升高,各组间比较有明显差异(P<0.05),且细胞抑制率随着作用时间的延长而升高。③不同浓度的VP-16(0μM、1 u M、5μM、25μM)作用于A549细胞48小时后,实验各组衰老细胞阳性百分率均增加,各组间比较有明显差异(P<0.05)。④不同浓度的VP-16(0μM、1μM、5μM、25μM)作用于A549细胞48小时后,G1期细胞百分率：实验1组无明显改变,实验2组明显增加,实验3组明显减少,实验1组和对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),其余各组间比较差异有统计学意义(P<0.01)；S期细胞百分率：实验1组无明显改变,实验2组明显减少,实验3组明显增加,实验1组和对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),其余各组间比较差异有统计学意义(P<0.01)；G2期细胞百分率各组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。⑤不同浓度的VP-16(OμM、1μM、5μM、25μM)作用于A549细胞48小时后,磷酸化Rb蛋白和Mdm2蛋白阳性百分率实验2组和对照组、实验1组、实验3组比较差异有统计学意义(P<0.05)；实验1组、实验3组和对照组之间比较差异无统计学意义(P>0.05),实验1组与实验3组比较差异也无统计学意义(P>0.05)。结论：①在体外,低浓度的VP-16能增加人肺腺癌细胞株A549细胞中衰老相关-p-半乳糖苷酶的活性,诱导A549细胞衰老；②低浓度的VP-16能减少磷酸化Rb蛋白和Mdm2蛋白的表达,使细胞周期停滞于G1期；③低浓度的VP-16可能通过Mdm2-Rb途径,使细胞周期阻滞于G1期,从而诱导细胞衰老。