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目的通过建立生长期兔颞下颌关节盘前移位模型、离体髁突压力加载培养、体外髁突软骨细胞应力加载培养,从体内体外两个方面,组织和细胞两个层面,研究生长期关节盘移位和不同应力对下颌骨髁突软骨内成骨的影响及其机制,并探索促进髁突软骨(细胞)软骨内成骨的适宜压力。方法1.颞下颌关节盘前移位对生长期兔髁突软骨内成骨的影响建立生长期兔颞下颌关节盘前移位模型,在1周、2周、4周、8周时处死取材,检测软骨内成骨标志物SOX9、血管内皮生长因子(Vascular endothelialgrow th factor,VEGF)、II型和X型胶原的表达变化。2.压力对离体生长期兔髁突软骨内成骨的影响将生长期兔髁突组织在不同压力(0kPa,15kPa,30kPa,45kPa,60kPa,75kPa)加载下离体培养,检测软骨内成骨标志物SOX9、VEGF、II型和X型胶原的表达变化以及髁突软骨细胞凋亡的变化。3.应力加载对生长期兔髁突软骨细胞成软骨和成骨能力的影响体外培养生长期兔髁突软骨细胞,经过不同大小应力(-50kPa,-30kPa,-10kPa,0kPa,50kPa,100kPa,150kPa,200kPa)加载后,检测软骨细胞增殖和凋亡、成软骨标志物II型胶原、蛋白聚糖(Aggrecan,AGG)和成骨标志物X型胶原、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)表达、细胞表面微观形态和超微结构变化。结果1.在生长期兔颞下颌关节盘前移位后1周,软骨变薄、退变萎缩,髁突软骨内成骨标志物表达均抑制;在盘移位2周后,软骨细胞代偿性增生,至4周时增生达高峰,到8周时增生失代偿,在此阶段内软骨肥大层变薄或消失,各软骨内成骨标志物不同程度抑制。2.离体髁突当承受适宜的压力负荷(30kPa)时,髁突软骨内成骨标志物表达增加,软骨增殖层、成熟层凋亡细胞增加,成骨、改建过程活跃;当承受的压力负荷在0kPa、15kPa时,髁突软骨内成骨标志物表达减少,髁突软骨内成骨能力下降;当承受的压力负荷在45kPa、60kPa和75kPa时,髁突软骨受到破坏,软骨内成骨标志物不同程度减少,软骨细胞凋亡增加,髁突软骨内成骨能力下降。3.正压:体外培养的髁突软骨细胞在150kPa时增殖增加,凋亡无明显变化,成软骨和成骨标志物表达增加;0kPa、50kPa和100kPa时,增殖增加、凋亡减少,成软骨和成骨标志物表达抑制;200kPa时,增殖减少、凋亡坏死增加,成软骨和成骨标志物表达抑制。负压:-10kPa和-30kPa时,增殖增加,凋亡无明显变化,成软骨和成骨表达无明显增加;-50kPa时,增殖和凋亡坏死增加,II型和X型胶原表达也增加。结论在生长期,颞下颌关节盘移位影响了髁突软骨内成骨过程,从而导致了髁突发育障碍。适宜的应力负荷使髁突软骨保持活跃的软骨内成骨能力;过小的应力负荷不足以刺激髁突发挥软骨内成骨能力;过大的应力负荷抑制髁突软骨内成骨。