【摘 要】
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本研究以Nogo-66为诱饵蛋白，酵母双杂交筛选人脑cDNA文库，获得了BEX1、Clusterin等候选结合蛋白。通过半乳糖苷酶检测和免疫共沉淀，证明了：Clusterin能与Nogo-B发生体外结合；BEX1
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本研究以Nogo-66为诱饵蛋白，酵母双杂交筛选人脑cDNA文库，获得了BEX1、Clusterin等候选结合蛋白。通过半乳糖苷酶检测和免疫共沉淀，证明了：Clusterin能与Nogo-B发生体外结合；BEX1 与Nogo-A、Nogo-B均能结合，且能与p75NTR形成复合物。
将Nogo-B与BEX1、Clusterin和Necdin质粒瞬时共转染CHO细胞后行流式细胞检测，证明BEX1、clusterin以及Necdin均可降低由Nogo-B引起的细胞调亡，且BEX1的抗凋亡效应明显高于clusterin和Necdin。将Nogo-B与BEX1共转染293T细胞，通过Hoechst核染色方法进行凋亡细胞形态分析发现，Nogo-B能够将BEX1由核分布为主转变为以胞浆分布为主，同时发生转位的绝大部分细胞Hoechst染色都呈现凋亡表型。
将Nogo-A、Nogo-B、对照质粒分别与等量GFP-BEX1质粒共转染293T细胞，荧光细胞计数和Western blot检测发现Nogo-A、Nogo-B均能降低BEX1的蛋白表达，尤其Nogo-A可以显著降低BEX1的蛋白水平。RT-PCR结果证实，过表达Nogo-A可以显著降低SH-SY5Y细胞内源性BEX1的mRNA水平。提示Nogo-A通过调节BEX1的mRNA水平来调节胞BEX1蛋白表达。
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