清脑益元汤对脑缺血损伤大鼠海马神经元c-jun、ATF2表达的影响

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目的:通过观察清脑益元汤对大鼠脑缺血损伤海马c-jun、ATF2表达的影响,探讨清脑益元汤对大鼠脑缺血损伤神经元保护的部分作用机制。方法:将成年健康雄性SD大鼠192只,按随机数字表分为两大组,每大组96只,继续随机分为4个亚组:空白组(A组6只)、假手术组(B组30只)、模型对照组(C组30只)、清脑益元汤组(D组30只)。B、C、D三组均按缺血损伤后1d、3d、7d、14d、28d五个处死时间点分为5个亚组(n=6),并分别作如下处理:空白组正常饲养,灌胃等体积蒸馏水;假手术组参照大鼠急性脑缺血损伤模型进行手术,但手术插入栓线长度仅为8mm,术后正常饲养,灌胃等体积蒸馏水;模型对照组灌胃等体积蒸馏水7d后,采用线栓法制成大鼠急性脑缺血损伤模型,继续予生理盐水灌胃至各处死时间点。清脑益元汤组灌胃等体积清脑益元汤7d后,采用线栓法制成大鼠急性脑缺血损伤模型,继续予清脑益元汤灌胃至大鼠各处死时间点。参考Longa的5分制法对大鼠进行神经功能缺损评分,并按各时间点进行标本采集。两组大鼠分别进行取材后,一组应用免疫组化法检测大鼠脑缺血侧海马c-jun细胞阳性的表达水平,另一组应用蛋白质印迹法(Western blot)检测大鼠脑缺血侧海马ATF2蛋白的表达水平。结果:1.神经功能缺损评分结果:空白对照组和假手术组大鼠神经功能缺损评分均为零,模型对照组和清脑益元汤组两组大鼠均出现不同程度的神经功能缺损,与模型对照组相比,清脑益元汤组大鼠的神经功能缺损评分较低,差异有统计学意义(p<0.05)。2.免疫组化法检测结果:与假手术组比较,模型对照组和清脑益元汤组大鼠c-jun细胞阳性的表达水平在各时间点均显著升高,差异有统计学意义(p<0.05),1d时开始呈现明显升高趋势,3d后开始出现下降趋势。与模型对照组比较,清脑益元汤组大鼠c-jun细胞阳性的表达水平在各时间点均有所降低,差异有统计学意义(P<0.05)。3.蛋白质印迹法(Western Blot)检测结果:与假手术组比较,模型对照组和清脑益元汤组大鼠ATF2蛋白的表达水平在各时间点均显著升高,差异有统计学意义(p<0.05),1d时开始呈现明显升高趋势,3d后开始出现下降趋势。与模型对照组比较,清脑益元汤组ATF2蛋白表达水平在各时间点均有所降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:清脑益元汤可降低大鼠脑缺血损伤后海马c-jun、ATF2蛋白的表达水平,这可能是其发挥脑缺血后神经元保护作用的机制之一。
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