HPLC/ESI-ITMS<'n>法鉴定三种生物碱及其大鼠体内主要代谢产物

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药物代谢研究在药物研究与开发上占有举足轻重的地位,中药成分代谢研究近几年也越来越引起人们的重视。中药成分代谢研究对中药作用机制探讨,中药新药研究,中药质量评价和临床用药等都具有指导和推动作用,已成为中药现代化研究的重要切入点之一。   高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS)是近十几年才来发展起来的一种用于药物研究的强大技术,具有快速、灵敏、准确、专属性强、样品预处理简单等特点,特别适合研究高极性、热不稳定性、高相对分子质量和低挥发度等有机化合物,在过去10年中有力地推动了药物研究的发展。将液质联用技术用于中药成分代谢研究,对于推动中药现代化进程,具有重要的理论意义和实用价值。   本文中我们以中药中三种生物碱成分:水苏碱(stachydrine),麻黄碱(ephedrine)和葫芦巴碱(trigonelline)为对象,开展了以下研究工作:   以三种生物碱标准品对HPLC/ESI-ITMSn色谱及质谱条件进行了优化,确定其保留时间,分析总结电喷雾质谱的一级电离规律和多级质谱裂解规律,以此作为其大鼠体内代谢物分析鉴定的依据。健康大鼠空腹给药后,收集不同时段尿样,经简单纯化后,直接采用HPLC/ESI-ITMSn方法对尿样进行测定。根据生物体内药物代谢转化规律及母体药物的色谱-质谱行为规律,在尿样中共鉴定出N去甲基、N-去甲基环氧化、氧化脱氢、环氧化等11种第Ⅰ相代谢产物和甘氨酸轭合、母药N-去甲基环氧化后甘氨酸轭合等4种第Ⅱ相代谢产物。实验方法灵敏、快速、选择性高、专属性好,实验结果基本证实了本法用于中药成分代谢研究的可行性。
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