番茄MADS-box基因SlFBP24功能研究

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在高等植物中,MADS-box蛋白家族作为一类庞大的转录因子家族,主要参与植物的生长发育,特别在决定花器官属性上扮演着重要的角色。根据在四轮花器官中发挥的不同功能,双子叶植物花发育同源异型基因大致可分为A、B、C、D、E五大类,这五类基因通过单独或共同作用影响着四轮花器官的形态发育,使植物完成正常的生殖生长,由此构成了花发育ABCDE分子模型。MADS-box基因占花发育ABCDE分子模型中的绝大部分,除此之外,研究证明在花发育ABCDE分子模型中还存在一个B类基因的亚家族基因—B-sister(Bs)基因,该亚家族的基因也属于MADS-box基因,能够参与调控植物花发育,特别是雌性生殖器官的发育。目前人们虽然对拟南芥中的Bs基因有较为全面的研究,但对番茄Bs基因功能的了解还很少,因此大量的相关研究工作仍是十分必要的。番茄(Solanum lycopersicum)属于茄科草本植物,是中国广泛种植的果蔬类植物。同时,番茄是一种研究果实发育和成熟的模式植物,Bs基因主要参与调控雌性生殖器官的发育,这对于研究番茄子房及胚的发育有重要意义。在本研究中,根据矮牵牛FBP24基因序列查找到一个番茄Bs基因SlFBP24(GenBank登录号:XM019211085)。通过与拟南芥、矮牵牛等植物中的MADS-box家族Bs基因的氨基酸序列进行系统进化比对,推测番茄SlFBP24基因编码的蛋白属于MADS-box家族MIKCC型。利用生物信息学网站预测表达模式以及实时定量PCR技术分析SlFBP24基因的组织表达模式,结果表明,SlFBP24基因在番茄花器官中表达量较高,进一步在花器官各个组织中的分析表明该基因在心皮中高量表达。为了进一步探索SlFBP24基因在花发育过程中可能发挥的功能,本研究同时使用RNAi技术和过表达技术分别在野生型番茄AC++中沉默和过表达SlFBP24基因,得到SlFBP24基因的沉默株系和过表达株系。沉默SlFBP24基因并没有发生表型变异,但是过表达倍数在1040倍的株系中种子活力减弱,过表达倍数高于80倍的株系出现番茄花器官整体变小,植株矮化,花粉不能正常萌发,且不能正常结实的现象。利用实时定量PCR检测野生型和过表达株系的赤霉素和生长素合成以及响应基因的表达量,分析结果显示,这些基因的转录水平发生改变化,从而使生长素和赤霉素的含量发生变化,最终导致花器官发育异常等表型。
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