鹅源新城疫病毒的分离鉴定及灭活疫苗的制备和免疫程序的优化

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鹅新城疫是由禽副粘病毒Ⅰ型(AMPV-1)即新城疫病毒(NDV)引起的鹅的急性、烈性和高度接触性传染病。新城疫病毒引起的疾病类型和严重程度有很大差异,也是危害最大的禽类病毒病,给全球造成了巨大的经济损失。目前,我国普遍采用新城疫弱毒疫苗对家禽进行免疫接种,使家禽产生免疫,预防新城疫的发生。大量研究结果表明,采用现行的鸡新城疫疫苗免疫鹅,不能获得较好的免疫保护。因此,开展鹅源新城疫病毒的分离鉴定,研制灭活疫苗是当前急需解决的现实问题。此外,由于不同地区、不同鹅群免疫状态不同,建立科学合理的免疫程序也非常必要。本实验从吉林省梅河口地区病死鹅的组织中分离得到一株病毒,将该病毒接种9~11日龄鸡胚可致其死亡,收集死亡鸡胚尿囊液进行血清学检测,结果表明尿囊液可与1%鸡血红细胞发生凝集,并且这种凝集作用可以被新城疫标准阳性血清所抑制,而EDS-76、AI(H5、H7、H9)标准阳性血清不能抑制这种凝集作用。对该病毒进行RT-PCR检测,结果发现与预期结果大小一致,进而确定该毒株为鹅源新城疫病毒,命名为MHK-1株。根据OIE对新城疫病毒毒力的判定标准和方法对该毒进行了鸡胚平均致死时间(MDT)、1日龄易感雏鸡脑内接种致病指数(ICPI)和鸡胚半数致死量(ELD50)的测定,结果表明MDT=55.2h, ICPI=1.76, ELD50=10-8.3/0.2ml,最终判定该株为新城疫强毒株。为了有效控制梅河口地区鹅新城疫的发生和流行,以在该地区分离到的新城疫强毒株作为种毒,制备新城疫灭活疫苗。经过物理性状检验、无菌检验、安全性检验和免疫效力检验,证明该疫苗稳定、安全,符合疫苗生产标准。用该疫苗免疫9-11日龄雏鹅,2周后获得了较高的抗体效价,第3周用未灭活的同源病毒进行攻击,免疫组雏鹅保护率为100%,而对照组全部死亡。拟定了3种免疫程序进行免疫程序优化实验表明,鹅新城疫灭活疫苗+新城疫弱毒疫苗(Lasota-clone30)试验组为最佳免疫程序,同时为了获得持久的保护率,应进行加强免疫。
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