加拿大金露梅的引种及微繁体系的建立

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以2005年从加拿大温哥华引进的金雨点金露梅为材料,在黑龙江省植物园进行引种栽植,并定期进行物候观测和生长节律测定,为了加速金雨点金露梅的推广,对其进行扦插扩繁和组培快繁试验。以金雨点金露梅的嫩枝和老枝为材料进行不同生长调节剂及浓度处理的扦插试验;以其嫩芽、叶片为外植体,通过组织培养的方法,运用L9(34)正交试验和二次正交旋转组合试验筛选出最适合的叶片与嫩茎不定芽分化、愈伤组织诱导与分化、芽苗继代增殖及组培苗生根的最佳培养基,从而为加拿大建立了一套“不定芽和愈伤组织诱导分化-继代增殖-生根培养”的快速繁殖体系。结果如下:(1)对引种3年的金雨点金露梅的生长量进行了定期测量、分析及物候期观察。(2)利用4种不同生长调节物质进行金雨点金露梅插穗生根培养,NNA和GGR对金雨点金露梅插穗生根有促进作用,生根率达91%以上;ABT和IBA对金雨点金露梅插穗生根诱导作用较小。选取嫩枝作为金雨点金露梅的插穗扦插生根效果比老枝好。(3)最佳叶片不定芽诱导组合是MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L,其中MS、6BA和NAA均为诱导的主要因子,影响顺序为MS>6-BA>NAA,分化率为51%。(4)嫩茎不定芽分化最佳培养基为MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2 mg/L,其中MS、6-BA和NAA均为诱导的主要因子,影响顺序为MS>6-BA>NAA,分化率为97%。(5)不定芽的继代与增殖培养中6BA对金雨点金露梅不定芽增殖的影响最大,NAA次之,KT影响最弱,其中6BA的影响均达到了极显著水平。定试管苗最佳增殖培养基为MS+NAA0.6+6-BA2.0+KT0.2,半月增殖倍数达6.12。(6)对生根培养三种激素(KT、NAA、IBA)进行方差分析,KT和NAA的影响均达到了显著水平(P=0.0001;0.0010),是影响生根的主导因子,而IBA的P值为0.4245,因此可以忽略其影响。最终确定生根培养基为MS+NAA0.1mg/L+KT1.0mg/L,生根数为8.6条,生根率为95.33%。(7)对愈伤组织诱导的三种因素(外植体类型,2,4-D,6-BA)进行方差分析得出外植体类型和2,4-D的影响均达到了显著水平,是影响愈伤组织诱导的主导因子,而6-BA影响未达到显著水平,因此可以忽略其影响。影响顺序为:外植体类型>2,4-D>6-BA,对愈伤组织诱导率进行多重比较得出最适愈伤组织诱导组合为:幼芽+MS+2,4-D4.0 mg/L+6BA0.5 mg/L(8)金雨点金露梅愈伤组织分化诱导:经过对三因素(NAA、6-BA、KT)的方差分析,3种因素的影响均达到了极显著水平,是影响叶片不定芽诱导的主导因子。影响顺序为:NAA>6-BA>KT。最终确定最佳诱导愈伤组织分化培养基为MS+NAA2.0mg/L+6BA1.0mg/L+KT0.5mg/L,分化率达55%。
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