家蚕生物反应器研究——转hGM-CSF基因家蚕及杆状病毒表达SARS-CoV M基因

来源 :苏州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:rainxiao
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
桑蚕生物反应器主要有两种形式;转基因桑蚕(transgenicsilkworm)和杆状病毒表达载体系统(BaculovirusExpressionVectorSystem,BEVS)。   本文将由家蚕核型多角体病毒(BmNPV)IE-1基因启动子及其控制下的hGM-CSF基因克隆到PigA3GFP中,构建了家蚕转基因载体PigA3GFP[IE-GMCSF],利用压力渗透法和精子介导法将此载体与其辅助质粒helper-pigA3导入家蚕,获得了发绿色荧光的家蚕。提取家蚕基因组DNA用PCR法可检测hGM-CSF基因,推测hGM-CSF基因已整合进家蚕的染色体,对G3代转基因家蚕用ELISA进行hGM-CSF的活性测定,结果表明转基因家蚕冻干粉中hGM-CSF的量为95ng/100mg。   另外,本文将SARS病毒的M蛋白完整基因克隆进原核表达载体pET28a(+),在大肠杆菌BL21中诱导表达,分析表明大肠杆菌中表达的重组M蛋白的分子量为28KD,与理论值相符,此外还有一条分子量为18kDa左右的条带,推测与大肠杆菌密码子的偏爱性或表达产物的降解有关;同时将M蛋白基因克隆到杆状病毒转移载体pBacPAK-His中,用BEVS表达了M蛋白。SDS-PAGE、WesternBlotting分析表明,而用杆状病毒表达的重组M蛋白的分子量为30KDa比理论值25.96KDa高,推测与表达产物的翻译后加工如糖基化有关。   
其他文献
随着社会经济发展,油气输送管道建设量迅速增加,大口径管道自动焊接技术快速发展。油气管道焊接往往在野外环境中进行,对焊接设备的便携性、焊接效率、焊接质量等都有较高的要求
食蚜瘿蚊[Aphidoletesaphidimyza(Rondani)]是贵州十字花科菜田捕食萝卜蚜[Lipaphiserysimi(Kaltenbach)]、甘蓝蚜[Brevicorynebrassicae(Linnaeus)]、桃蚜[Myzuspersicae(Su
癫痫病灶可精确定位,其治疗可用微创外科手术[1].我院于2015-01 至2019-01 对120 例磁共振阳性的颞叶癫痫患者进行标准前颞叶切除术,疗效较好.磁共振阳性的颞叶皮质癫痫为顽
第一部分 CLN8P相互作用蛋白质的筛选 目的 CLN8是神经元蜡样脂褐质沉积症(the neuronal ceroid lipofuscinoses,NCLs)这一疾病群中的一个致病基因。关于其功能知之甚少
现代语音识别技术与嵌入式技术相结合,使语音控制成为设备可选用的控制方法之一。许多大型公司和研究机构也设计出一批性能优越、可靠性高的语音识别芯片,它们被广泛应用于消
本文通过研究2003年余杭、2004富阳不同施氮水平对水稻生长变化、器官氮含量、水稻产量、土壤氮累计、渗漏水氮素污染、氮素利用率、最佳经济施氮量影响的基础上,对水稻施氮优化模拟模型(Rice fertilizer-N OptimizationSimulation Model,RNOSM)进行了验证和应用,确定了两地较合理的施氮量和施氮时间。最后对RNOSM 模型的网络化进行探索,建立了模型参数的网
首先我们提出了一个假设:SEB也可以直接激活脑内胶质细胞和有关神经元,引起脑内免疫反应并激活HPA轴。然后通过本实验对这一假设进行了初步研究证实。本实验首次对超抗原SE
本文通过对荣华二采区10
期刊
碳青霉烯类抗菌药物是抗菌谱最广、抗菌活性最强的非典型β-内酰胺抗生素,因其具有对β-内酰胺酶稳定及低毒性等特点,成为治疗严重细菌感染最主要的抗菌药物之一.近年来随着
随着微创技术在医学领域的广泛应用,腹腔镜手术在临床实践中也取得了快速的发展,与开腹手术相比,腹腔镜手术可改善创面愈合,减轻术后疼痛,缩短恢复期及住院时间,减少住院费用