基于杂化链反应和纳米粒子放大信号的电化学免疫传感器

来源 :安徽师范大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:peterqiu123
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最近,电化学免疫传感器在农业、生物医学、质量监控和环境等领域中取得了巨大的进展。但是免疫传感器目前面临着许多困难,为了解决这些难题需要高灵敏、高选择免疫传感器。本文采用杂交链式反应和纳米材料相结合信号放大策略,制备了三种简单灵敏、高选择的电化学免疫传感器,并用于炎症标志物C-反应蛋白的检测。论文主要包括以下四个方面:第一章:概述电化学免疫传感器最新进展。第二章:制备了一种基于杂化链反应放大信号,用于检测C-反应蛋白的夹心型电化学免疫传感器。首先将一抗固定在金纳米粒子修饰电极的表面上;随后在修饰电极表面上依次固定抗原、二抗复合物,通过抗原抗体之间的特异性识别形成夹心型免疫结构,最后通过杂交链式反应将吸附或嵌入一定量六氨基合钌的长链DNA串联体连接至夹心型结构。使用差示脉冲伏安法(DPV)记录六氨基合钌氧化峰的电流响应信号。实验过程中对检测液的pH、温育时间、杂化时间进行了优化,在最优的条件下,传感器对CRP的检测实现了宽的线性范围和低的检测限。第三章:制备了一种基于杂化链反应和银纳米粒子信号放大的策略,用于C-反应蛋白检测的电化学免疫传感器。在实验中,选用银纳米粒子作为信号分子,在形成的DNA串联体上吸附或嵌入一定量的银纳米粒子作为信号探针。之后再与制备好的免疫夹心结构“一抗-抗原-二抗复合物”连接,构成一个灵敏度高的电化学免疫传感器,差示脉冲伏安法(DPV)记录银纳米粒子的氧化峰信号。对pH、温育时间进行了优化,在最优的条件下,银纳米粒子氧化峰电流变化值与CRP浓度的对数在0.5pg mL-175 ng mL-1范围内显现良好的线性关系,最低检出限为0.17 pg mL-1。第四章:制备了一种基于铜离子标记二氧化硅球作为信号探针检测C-反应蛋白(CRP)的免疫传感器。首先,金纳米粒子修饰在裸玻碳电极上,再将目标物的一抗和抗原固定在修饰电极表面上,之后选用功能化的二氧化硅球-金纳米粒子复合物负载目标物的二抗和铜离子,将它作为信号探针,通过免疫反应,抗原与抗体特异性识别,信号探针与目标物连接,构成了一个夹心型免疫复合物,使传感器的电流响应信号得到极大的提高。利用差示脉冲伏安法(DPV)记录铜离子电流信号,在最优的实验条件下,CRP浓度的检测范围是1.0 pg mL-1100 ng mL-1,检测限为0.33 pg mL-1。
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