鹅掌草二近缘种三萜皂苷类成分的含量测定及抗肿瘤作用的研究

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目的:通过HPLC测定鹅掌草二近缘种皂苷成分的含量及总皂苷和单体皂苷的抗肿瘤作用,为控制鹅掌草近缘种的质量及开发提供实验依据。  方法:通过HPLC进行含量测定,并通过线性考察、精密度试验、稳定性试验、重复性试验及加样回收率试验对鹅掌草二近缘种进行质量控制,并且通过MTT法及流式细胞仪法对四种体外培养肿瘤细胞的抑制作用、对细胞凋亡的影响来检验总皂苷及单体皂苷的抗肿瘤作用。  结果:(1)通过HPLC测定,安徽银莲花单体皂苷化合物6-8的含量分别为:0.9088%、0.8007%、1.3960%,鹤峰银莲花单体皂苷化合物9-13的含量为:0.8832%、0.8837%、0.8741%、0.8659%、0.8204%,从结果中可发现其线性关系、精密度、稳定性、重复性均良好,且回收率均也符合规定。  (2)安徽银莲花、鹤峰银莲花总皂苷在20μg·mL-1和40μg·mL-1时对四种肿瘤细胞生长有抑制作用,并在此有效浓度内有促进肿瘤细胞凋亡的作用。  (3)根据对肿瘤细胞的半数抑制浓度可以判断皂苷抗肿瘤能力的强弱:IC50<5.0μmol·L-1作用强,5.0μmol·L-1<IC50<10.0μmol·L-1作用较强,10.0μmol·L-1<IC50<20.0μmol·L-1作用较弱,可见化合物9、13对所有试验的肿瘤细胞抑制作用均较弱;化合物10对人肝癌HepG2细胞株有强的抑制作用;化合物11对人宫颈癌HeLa细胞株、细胞株加脂多糖(LPS)诱导COX-2高表达模型均有强的抑制作用。在浓度为5.0μmol·L-1时,单体皂苷均能诱导4种肿瘤细胞的凋亡。相对于其他肿瘤细胞,皂苷化合物10处理后对人肝癌HepG2细胞株引起的凋亡率最大(27.51±2.13%);化合物11对人官颈癌HeLa细胞株、HeLa细胞株加脂多糖(LPS)诱导COX-2高表达模型凋亡影响较大(凋亡率>20%),这和其对肿瘤细胞的抑制作用结果一致。  结论:安徽银莲花及鹤峰银莲花总皂苷及所含单体皂苷对四种肿瘤细胞皆有抑制作用,并且其抑制作用是随着药物浓度的增加而逐渐的加强,且鹅掌草二近缘种的抗肿瘤作用的重要途径可能是其所含单体皂苷类成分诱导肿瘤细胞凋亡。
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