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在辅助生殖技术(ART)过程中卵母细胞发育潜力的评估越来越受到关注。生产实践应用上,最佳卵母细胞成熟质量的选择和鉴定,将有助于提高生产胚胎比率和卵母细胞的冷冻保存的效果。取卵过程中卵泡液(FF)或壁层颗粒细胞容易获得,是理论上最优的非伤害性的评价卵母细胞发育潜力生化指标的来源。然而,目前还没找到可以作为衡量卵母细胞发育潜力的可靠标志物质的分子来预测卵母细胞的发育与妊娠。因此,本研究目的是寻找能评价猪卵母细胞发育潜力标志分子的物质。钠肽系统,包括钠肽片段(NPs)和相应的同源受体(NPR)在几个物种中抑制卵母细胞减数分裂来控制卵母细胞的核成熟,然而,NPs与猪卵母细胞的发育潜力关系并不清楚。本研究发现:直径为3.0 - 8.0 mm卵泡的颗粒细胞中NPR2的mRNA水平一直保持稳定的表达,而NPPB和NPPC的mRNA水平随着卵泡直径的增加而增加。在直径3.0 - 6.0 mm的卵泡的卵泡液中BNP和CNP的浓度分别为52 - 58 ng/ml和36 - 43 ng/ml,但是到了直径6.1 - 8.0 rmm的卵泡BNP和CNP的浓度则显著下降,分别为44 ng/ml和35 ng/ml。与此相一致的是,直径3.0-6.0 mm卵泡的卵母细胞经体外培养再经IVF后的卵裂率和囊胚率随卵泡直径增大而增加,但是卵泡直径为6.1 - 8.0 mm的卵母细胞的卵裂率和囊胚率则呈现下降趋势;发生卵裂的单个卵母细胞的卵泡中的BNP和CNP维持在特定浓度(BNP: 45 - 65ng/ml, CNP: 30-45ng/ml)。由此可见钠肽片段的水平对维持卵母细胞的发育潜力起到重要作用,可以作为衡量较大卵泡的卵母细胞发育潜力的标志物。进一步研究表明:100 ng/ml BNP/CNP不同浓度的组合对体外培养的卵母细胞具有相似的减数分裂抑制作用;NPs对不同直径分类卵泡的卵母细胞的影响是不同的,卵母细胞成熟前培养添加BNP或CNP能够提高来自3.0 - 6.0 mm卵泡的卵母细胞的卵裂率和囊胚率,但是不能提高来自6.1-8.0 mm卵泡的卵母细胞的卵裂率和囊胚率。值得注意的是,与对照组相比,通过孤雌激活(PA)和IVF不同的实验都证实来源于3.0 - 4.0 mm的卵泡卵母细胞在含有100 ng/ml的BNP或CNP前成熟培养基中培养20小时卵母细胞的发育潜力提高2-3倍(P<0.001)。因此,前成熟培养添加NPs有助于提高来源于猪3.0 - 4.0 mm卵泡的卵丘-卵母细胞复合体(COCs)体外培养的卵母细胞的发育潜力。此外,我们用流式细胞仪鉴定了不同卵泡中颗粒细胞中生长激素受体(GHR)蛋白表达情况,证实了其基因与蛋白的表达与卵母细胞的发育潜力相关联,GHR可以同时作为反映卵母细胞发育潜力的标志分子。