中药全蝎的提取优化与功能初探

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全蝎是将野生马氏正亚钳蝎(又称“东亚钳蝎”)加工炮制而成的一味传统中药材。它在我国已有1000多年的药用史,具有抗癫痫、抗惊厥、镇痛、抗肿瘤及免疫调节等多种药理学功效。长期以来,全蝎认识的局限性导致了全蝎药材质量控制方法严重滞后。反之,全蝎药材质量控制方法滞后又限制了全蝎的认识与现代化利用。本论文拟开展全蝎的提取方法,探索全蝎的有效成分和生物学功能,为建立更加科学的全蝎质量控标准提供参考。首先,本论文优化了全蝎蛋白成份的浸取方法。本研究从全蝎饮片出发,将全蝎分为蝎身和蝎尾两个部分分别进行科学探究。通过综合比较紫外杀菌、60Co-γ射线辐照杀菌、高压蒸汽灭菌这3种方法对除菌效果和全蝎提取成分的影响,发现60Co-γ射线辐照法是全蝎药材除菌的有效方法。综合考察了温度、料液比、溶剂、时间等因素,通过正交试验,发现温度是影响全蝎有效成份提取的主要因素,确定了温度60℃,料液比1:30,乙醇浓度50%,提取时间6 h为全蝎有效成份最优的提取方法。为了避免全蝎中盐对全蝎有效成份的生物学功能评价的影响,本论文采用透析方法确定了以截流量为100 Da的透析袋能够有效去除全蝎样品中盐份,也表明了现行药典中浸出物含量检测作为质量控制指标的不合理性。其次,本论文初步开展了全蝎浸出物的成份分析与功能探索。根据优化的提取方法,我们发现了不同来源的全蝎浸出物具有相似的紫外光谱特征,但具有一定差异的色谱分离特征。体外细胞实验发现全蝎具有一定的抗肿瘤效果,其中蝎身提取物的抗肿瘤效果强于蝎尾;不同的肿瘤细胞对于提取物的敏感性不同,胃癌细胞AGS、结肠癌细胞HCT116、白血病细胞系HL-60、Jurkat、Raji对蝎身提取物的敏感性强于其他细胞。电生理实验发现全蝎提取物仍具有比较强的离子通道调节活性,其中蝎尾提取物能够抑制不同钾通道电流,对钾通道Kv1.2、Kv1.3、Kv4.1的半数抑制浓度IC50值分别为46.2±4.5μg/mL,192.8±22.6μg/mL,141.2±34.3μg/mL;蝎身对某些通道只具有较弱的抑制效果。此外,我们将全蝎经煮制所得的提取物进行相关功能实验,发现它们的效果相较于未经煮制都有所下降,这说明已炮制的全蝎有可能不适宜再煎煮服用。综上所述,本文优化确定了一种全新的全蝎提取方法,探究了全蝎的成分组成并对其功能做了初步探究,为未来建立更加科学合理的全蝎质量标准提供生物学依据。
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