【摘 要】
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目的:本研究旨在探讨肝细胞癌（HCC）患者外周血CD4+T细胞、CD8+T细胞中表面抑制性受体PD-1、TIM-3、TIGIT和CTLA-4及抑制性细胞因子IL-10的表达状态,以及探索HCC患者CD4+T细胞免疫耗竭、CD8+T细胞免疫耗竭及其临床价值的研究分析。方法:（1）收集HCC患者、健康体检者外周血标本,全自动血液分析仪进行白细胞计数与分类。（2）利用密度梯度离心法得到HCC患者、健康体
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目的:本研究旨在探讨肝细胞癌（HCC）患者外周血CD4+T细胞、CD8+T细胞中表面抑制性受体PD-1、TIM-3、TIGIT和CTLA-4及抑制性细胞因子IL-10的表达状态,以及探索HCC患者CD4+T细胞免疫耗竭、CD8+T细胞免疫耗竭及其临床价值的研究分析。方法:（1）收集HCC患者、健康体检者外周血标本,全自动血液分析仪进行白细胞计数与分类。（2）利用密度梯度离心法得到HCC患者、健康体检者外周血单个核细胞（PBMCs）。（3）利用流式细胞术（FACS）进行CD4+T、CD8+T细胞上相关表型分子表达的检测。（4）进行CD4+T、CD8+T细胞细胞因子分泌功能的流式检测。（5）流式细胞微球阵列术（CBA）检测血清中细胞因子的含量。结果:（1）HCC患者外周血CD4+T细胞、CD8+T细胞中PD-1、TIM-3、TIGIT和CTLA-4表面抑制性受体表达比例均高于健康对照组。（2）HCC患者外周血中TIM-3+TIGIT+CD4+T、PD-1+TIM-3+CD4+T、TIM-3+TIGIT+CD8+T、PD-1+TIM-3+CD8+T、PD-1+TIGIT+CD4+T、PD-1+TIGIT+CD8+T细胞表达水平升高以及PD-1在TIM-3+TIGIT+CD4+T、TIM-3+TIGIT+CD8+T细胞上表达升高。（3）ROC曲线分析HCC患者外周血中TIM-3+TIGIT+CD4+T、TIM-3+TIGIT+CD8+T、PD-1+TIM-3+CD4+T、PD-1+TIM-3+CD8+T、PD-1+TIGIT+CD4+T、PD-1+TIGIT+CD8+T细胞比例在HCC的诊断效能均大于单分子阳性细胞比例。（4）HCC患者外周血IL-10+CD8+T、IL-10+CD4+T细胞表达百分比以及血清细胞因子IL-10含量均高于健康对照组,IFN-γ+CD8+T、IFN-g+CD4+T细胞表达百分比及血清细胞因子IFN-g含量均低于健康对照组。（5）HCC患者外周血IL-10含量与TIM-3+TIGIT+CD8+T细胞、TIM-3+TIGIT+CD4+T细胞、PD-1+TIGIT+CD4+T、TIGIT+CD4+T细胞表达百分比呈正相关（6）HCC患者外周血TIM-3+TIGIT+CD8+T细胞、TIM-3+TIGIT+CD4+T、PD-1+TIGIT+CD8+T细胞、PD-1+TIGIT+CD4+T细胞比例高值组中性粒细胞/淋巴细胞比值（NLR）均高于其低值组。结论:HCC患者肿瘤微环境中CD4+T、CD8+T细胞存在免疫耗竭现象。相较于单一抑制性受体,两种抑制性受体共表达水平可能对HCC的病程及预后具有一定的参考价值。且有意义的双分子或多分子靶向治疗可能会具有更大的临床应用价值,为HCC提供更新颖、更有效的治疗方案,可能在肿瘤患者的免疫检查点阻断治疗中发挥作用。
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