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在世界范围内,临床型奶牛乳腺炎(Bovine mastitis)都是牛奶产业面临的严重问题,每年都会因此带来严重的经济损失。尽管人们采取了许多防治措施,但是仍然没有显著的改变目前的现状。革兰氏阴性菌是引发奶牛产生临床型乳腺炎的重要因素,并且这种患病奶牛往往会表现出严重、急性的临床症状,导致产奶量下降,甚至会导致奶牛个体的死亡。脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)是革兰氏阴性菌的细胞膜成分,同时也是革兰氏阴性菌引发奶牛临床型乳腺炎的主要部件。白细胞分化抗原14(CD14)是脂多糖/脂多糖结合蛋白( LPS/LBP)复合物的受体蛋白,主要参与机体对革兰氏阴性菌的吞噬与消化,在机体先天免疫系统的重要组成部分,然而,奶牛 CD14基因多态性及其与中国荷斯坦奶牛临床型乳腺炎之间的联系相关的研究尚不清晰。 本研究是应用单链构象多态性(PCR-SSCP)方法对中国荷斯坦奶牛 CD14基因多态性进行分析。结果在奶牛CD14基因中共检测到3个SNP位点,且都是位于CD14第二外显子区域,分别为等位基因B中g.528 A→C(147Ser→Arg),等位基因D中g.612 A→G(175Asn→Asp),以及等位基因F中 g.1022A→G。其中等位基因B中g.528 A→C(147Ser→Arg),等位基因D中 g.612 A→G(175Asn→Asp)两个位点导致了氨基酸的改变,g.528 A→C导致蛋白质147位点由丝氨酸转变为精氨酸,g.612 A→G导致蛋白质175位点由天冬酰胺转变为天冬氨酸,并且这两个改变都导致蛋白质二级结构发生改变。在本研究中检测的134头奶牛中发现了3种潜在的CD14蛋白质类型,但是通过三级结构预测,并未在这三种潜在蛋白质类型三级结构中发现差异。三级结构预测显示这两个氨基酸改变位点位于 CD14蛋白的凹面处。功能位点分析显示g.528 A→C(147Ser→Arg)导致一个蛋白激酶C磷酸化位点(PKC phosphorylation site)向前迁移。这个功能位点上的 SNP可能使得奶牛 CD14蛋白功能发生变化。疾病相关性分析显示 AB(杂合型 g.528A/C),CD(杂合型 g.612A/G)基因型的奶牛个体的乳腺炎发病率明显高于其他基因型奶牛个体乳腺炎发病率,表明这两种基因型可能影响了CD14基因的表达,并且与奶牛乳腺炎易感性相关。