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核糖体由核糖体RNA和核糖体蛋白组成。植物核糖体的组成蛋白共81种,每种都包含2-7个序列不同的成员。不同成员组合使得核糖体具有了高度的组织特异性,这是植物核糖体区别于其他真核生物的重要特征,也被认为是植物适应固着生长和环境变化的方式之一。研究显示,R蛋白除了做为核糖体的组成部分维持rRNA构型外,还可以通过翻译过程,或者演化出核糖体外的功能来参与植物的生长发育及响应胁迫应答的生理过程。 本文借助反向遗传学手段,以核糖体蛋白编码基因P0-B的T-DNA突变体p0-B为材料,结合形态观察、遗传杂交、多种细胞与分子生物学手段以及生物信息学分析研究了该基因的生物学功能。首先,T-DNA插入到P0-B基因的3调控区,造成了该基因表达水平降低,仅为野生型的1%。P0-B是P0蛋白家族中三个成员之一,RT-PCR和融合GUS报告基因检测结果显示,P0家族中P0-B是表达最高的一个,且主要在根尖、叶尖等分生组织区域表达。P0-B基因的低水平表达造成了拟南芥生长表型的缺陷,根的生长受到显著抑制,并且突变体的根尖分生组织区的细胞显著减少,成为导致突变体根短的直接原因;其次,通过基因表达分析,发现根尖控制分生组织区的静止中心标记基因WOX5的表达在突变体中极度升高,是野生型的4.5倍,暗示着突变体根尖干细胞微环境的平衡遭到破坏,成为导致根尖分生组织减少的因素;第三,进一步通过检测调节根尖分生组织相关基因的转录及蛋白水平的表达变化,证实了p0-B中生长素/PLT信号途径受到了影响,其中调控静止中心生长素信号的转录因子PLT2和调控生长素运输的PIN347的表达水平均显著降低,说明核糖体蛋白P0-B通过生长素信号途径参与了调节根生长发育的生理过程。综上,P0-B可能通过翻译调控或演化出的核糖体外的转录调节活性,参与调节了根尖生长素信号途径相关因子的表达,进一步参与调节了根的生长发育过程。