瓦松繁殖技术与药材质量研究

来源 :山东中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ajimide001
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目的:调查瓦松的生态学习性与分布范围,研究瓦松种子繁殖与扦插繁殖技术,检测市售瓦松药材活性成分与金属元素含量,了解市场瓦松药材质量状况,为实现人工栽培、合理控制药材质量提供理论依据。方法:实地调查或检索文献厘清瓦松的生长环境与分布范围;利用解剖镜、显微镜及其常规制片技术,研究植株形态特征和根、茎、叶显微结构特征;利用显微镜、扫描电子显微镜观察种子及花粉粒的微观形态特征;在培养箱内,通过控制温度、光照、基质、激素处理等手段,研究种子繁殖与叶片、茎段扦插的成活率;利用正己烷在索氏提取器中提取脂溶性物质,在甲酯化的基础上,利用GC-MS分析其所含脂肪酸类成分;采用HPLC测定槲皮素和山奈素含量,利用电感耦合等离子体发射光谱法ICP-OES测定金属元素含量;使用Microsoft Excel2010和SPSS统计软件进行数理统计分析。结果:(1)虽然瓦松的分布范围较广,但其生长环境相对严格,根系纤弱,分布较浅,没有明显主根,在实现人工栽培的过程中,其生长条件相对难以模拟,这也是目前尚未大面积种植的根本原因。(2)瓦松为二年生草本,一年生植株为莲座状,莲座叶肉质呈线形。第二抽茎并形成花序,叶互生,呈线形至披针形。总状花序,花瓣5枚,雄蕊10枚,花药紫色。一年生植株根部表皮细胞微栓质化,木栓层为数列颓废状细胞,形状不规则;皮层较狭窄;韧皮部射线明显,筛管成群分布,韧皮纤维发达;次生木质部二原型,无髓。两年生植株根部表皮细胞微栓质化;木栓层为数列颓废状细胞;次生木质部较宽广。两年生植株茎横切面有表皮、皮层、维管组织和髓部。最外层为1层表皮细胞;皮层约占茎部半径的2/3;形成层成环;髓部较大。叶上、下表皮均为不规则多角型单层细胞,有气孔,为典型的不等型。(3)瓦松既可以采用种子繁殖,也可以利用叶片、茎段扦插进行繁殖。瓦松种子萌发基本没有休眠限制,在15℃~25℃的温度范围内,只要水分供应充分,发芽率、发芽势和发芽指数随着温度升高而增加,但温度达到30℃时,种子的发芽率、发芽势和发芽指数均明显开始降低,因此瓦松种子的最适宜萌发温度应为25℃上下。由于瓦松种子细小,有性繁殖时幼苗生长缓慢,又加上属于两年生植物,药材产量很低。利用叶片或茎段进行扦插繁殖,生根率和成活率均能达到80%以上,且在6天左右基本都能生根,说明瓦松叶片或茎段扦插均能成活且生根较快。茎段扦插成活率高于叶片扦插。温度、激素处理、基质等对扦插成活率均有影响。扦插最适温度为25℃~30℃,生根粉与200mg/L NAA处理均能获得较高的成活率,蛭石+河沙+混合土(1:1:1)是扦插适宜基质。(4)从瓦松药材正己烷提取物中共检出24种脂溶性成分,鉴定出20种,包括脂肪酸类、酯类、烷烃类和酮类。其中脂肪酸类成分14种,占已鉴定总组分的58.19%,含量较高的脂肪酸有棕榈酸(7.017%)、亚油酸(19.72%)、亚麻酸(8.913%)、硬脂酸(11.60%)、二十四烷酸(3.045%)和蜡酸(2.470%)。邻苯二甲酸二正辛酯(22.40%)是瓦松正己烷提取物的主要脂溶性成分。(5)18个批次瓦松药材样品中,槲皮素与山奈素的含量具有明显差异,其中有8批样品未达到药典要求的含量指标。槲皮素含量与粉末L*、a*、b*、c*、h*均呈显著正相关,山奈素含量与粉末L*、b*、c*、h*负呈相关,与a*呈正相关,且山奈素素含量与h*呈极显著负相关(P<0.01),与a*呈显著正相关(P<0.05);总含量与L*、a*、b*、c*呈正相关,与h*呈负相关,且与a*呈极显著正相关(P<0.01),与h*呈显著负相关(P<0.05)。(6)18个批次瓦松药材样品中,Ba含量为111~269mg/kg,Cd含量为1.35~2.83mg/kg,Co含量为3~26mg/kg,Cr含量为64~898 mg/kg,Cu含量为0~74.34 mg/kg,Se含量为0~3 mg/kg,Sr含量为227~725 mg/kg,Zn含量为72.1~131.96 mg/kg,不同批次瓦松药材含量差异也较大。结论:摸清了瓦松的生态学习性、分布范围;建立了种子繁殖与叶片、茎段扦插繁殖技术体系;对市售瓦松药材中的槲皮素、山奈素及Ba、Cd、Co、Cr、Cu、Se、Sr、Zn等8种金属元素含量进行了检测,发现不同批次药材之间含量差异很大;槲皮素、山奈素含量与药材粉末颜色之间具有明显的相关性;邻苯二甲酸二正辛酯(22.40%)是瓦松正丁烷提取物中最主要的成分,且系首次从瓦松属植物中检出。从而为实现瓦松人工引种驯化及药材质量控制奠定了坚实的基础。
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