第一部分组织纤维酶原激活物在大鼠脑缺血再灌注损伤中作用及其机制的研究目的:本实验通过建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,探讨内源性tPA在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤中的作用机制及其抑制剂tPA-Stop预处理对脑缺血再灌注损伤的影响。方法:健康成年雄性清洁级SD大鼠随机分为假手术组(Sham )、缺血对照组(Control)、实验组(Experiment)。每组又分为缺血再灌注6 h组、12 h组、24 h组。采用栓线法建立大脑中动脉阻塞模型,缺血2 h后拨出线栓再灌注。实验组大鼠经脑室注射tPA-Stop 2μg,假手术组和对照组大鼠脑室注射相同剂量的生理盐水。在各个时间点进行神经功能评定,取标本TTC染色测量梗死体积、HE染色形态学观察、Nissl染色测定神经元存活率、TUNEL法测定凋亡细胞数。并通过免疫组化和原位杂交技术观察tPA的表达,并对其活性进行测定。同时对MMP9的活性进行测定。结果:(1)脑缺血后内源性tPA在脑内大量表达,缺血再灌注早期主要由内皮细胞表达,随后胶质细胞表达增加。(2)内源性tPA在脑内大量表达,加重了脑缺血后继发性损害,使脑梗死体积扩大,神经元存活率降低,凋亡细胞数增加。(3)内源性tPA主要通过激活和上调