新型吸附膜及其血液净化应用研究

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血液净化是一种治疗家族性高胆固醇血症、脓毒症、肝肾衰竭等疾病的重要医疗手段。吸附剂作为血液净化治疗中的关键基础材料,其性能和理化特性对不同疾病的治疗起着至关重要的作用。目前主流的临床应用吸附剂在完成疾病治疗的同时,也存在着吸附效率低、成本高等问题。本文利用一种新型微孔膜,通过化学改性制备了具有不同吸附特性的吸附膜,研究了相关吸附膜对胆红素和自身抗体(主要成分是hIgG)的吸附性能,为血液净化研究提供新思路。本文首先对聚乙烯乙烯醇(EVOH)为材料制备的多孔微通道膜(MMCF)进行了表征分析,静态接触角和溶血试验结果显示MMCF膜具有良好的亲水性和血液相容性,适合作为膜基质。接着用扫描电镜、压汞法以及逆体积排阻法分别分析了 MMCF膜的孔径和孔径分布,并与琼脂糖微球吸附剂进行了比较,前者微孔孔径大小在100-10000 nm之间,通道平均尺寸为300 μm,而后者平均孔径为100 nm,孔径范围为2-240 nm。进一步组装了空白MMCF膜吸附柱,测量不同缓冲液流速下的柱压,验证了其高流速的特性。用人血液中的两种主要蛋白人免疫球蛋白(hIgG)和人血清白蛋白(HSA)作为模型蛋白进行了 MMCF膜吸附柱的非特异性吸附分析,实验结果表明该膜的非特异性吸附极低,具有良好的血液吸附应用基础。接着,在MMCF膜上偶联了乙醇胺(ETA)、乙二胺(EDA)、二乙烯三胺(DETA)、二乙胺乙基(DEAE)、己二胺(HMD)等吸附配基,研究了胺基改性MMCF吸附膜对胆红素的吸附性能,发现HMD-MMCF膜效果较佳,静态吸附载量为13.5 mg/g基质,当胆红素浓度为0.25 mg/ml时,达到吸附平衡,饱和吸附载量为28.4mg/g基质。另外,HMD-MMCF膜的吸附性能受NaCl、白蛋白添加物的影响。与空白MMCF膜吸附柱相比,该吸附膜制备的吸附柱动态吸附效果明显。血液亲和吸附柱具有选择性好,对血液中其它成分干扰少,以及快速高效副反应低等特点。因此,本研究在上述基础上进一步偶联了乙酰化-苯丙氨酸-酪氨酸-组氨酸-谷氨酸(Ac-FYHE),通过亲和吸附作用,用于特异性地除去过量的自身抗体,有助于自身免疫性疾病的治疗。红外光谱和扫描电镜等实验结果表明MMCF膜被成功改性并且其微观结构没有发生明显改变。用不同浓度的hIgG溶液考察了 Ac-FYHE-MMCF膜吸附性能,得到静态平衡载量和动态平衡载量分别是9.31 mg/ml和3.47 mg/ml。在蛋白吸附过程中将流速从0.5 ml/min升高到10 ml/min,发现Ac-FYHE-MMCF膜对hIgG捕获率的下降幅度较小,表明其高流速下仍保持较好的吸附能力。在pH 7.4下从hIgG/HSA混合蛋白和人血清中分离了hIgG,纯度都超过80%,表明制备的Ac-FYHE-MMCF新型吸附膜具有抗体选择性好、处理效率高、使用成本低等特点。
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