手部慢性特殊感染在沿海地区是常见多发的疾病,由于其病程长,治疗困难,预后不佳并可能遗留严重的功能障碍,因此所造成的社会危害较大。多年来对其致病因素一直存在争议,其中包括普通细菌,结核,非结核分枝杆菌,真菌,诺卡氏菌等等。尽管不少学者曾经提出可能是结核菌或非结核性分枝杆菌,但相关系统的研究国内几乎没有,尤其缺乏细菌学证据的支持。目前对该病的认识尚处于初级阶段,临床诊断和治疗也只建立在经验性诊断和治疗基础上。根据该病的症状、体征和特殊的病理变化,再结合国内外相关资料,我们认为该病可能是分枝杆菌尤其非结核分枝杆菌感染所致。本文的目的是首先从寻找细菌学依据入手,证实我们的假设或找到其真正的病原体,在病因学和药物敏感性实验的基础上建立更为合理的早期诊断及治疗措施。 第一部分:手部慢性特殊感染病灶的细菌学培养和菌种鉴定 为探讨沿海地区手部慢性特殊感染的致病因素,与结核的关系,为临床早期正确诊治提供依据,我们对2002年6月—2005年3月收治的48例沿海地区手部慢性特殊感染病例作组织病理检查,直接抗酸染色,普通细菌培养,真菌培养,分枝杆菌培养,并对分离菌株进行生化分型和基因鉴定。研究发现:直接抗酸染色检查5例阳性,微生物学检查出星形诺卡氏菌1例,混合感染表皮葡萄球菌和木糖氧化产碱杆菌各1例,分枝杆菌17例,总阳性率35.4%。其中海分枝杆菌13例,鸟、偶发分枝杆菌各1例,不产色分枝杆菌1例,结核杆菌1例。 结论:手部慢性特殊感染患者应同时做常规细菌培养,真菌及分枝杆菌培养。非结核分枝杆菌感染尤其是海分枝杆菌远比结核菌常见,可能是沿海地区手部特殊感染的主要致病因素。 第二部分:PCR结合测序技术直接检测病灶中分枝杆菌的初步研究 利用PCR结合测序技术早期快速检测手部慢性特殊感染病灶中的分枝杆菌,为临床早期诊断,治疗提供直接依据。方法采用Nest-PCR技术直接检测37例手部慢性特殊感染病灶中的分枝杆菌,并进行分枝杆菌的核酸测序分型。结果:PCR阳性结果24例,阳性率64.9%。经测序分型后海分支17例,堪萨斯/胃2例,鸟分支2例,结核2例,龟/脓肿1例。结论:Nest-PCR技术弥补了肺外分枝杆菌培养阳性率低下的缺陷,大大缩短了诊断所需要的时间(从传统诊断的2个月缩短到数天)尤其适用于培养阴性而又不能排除分枝杆菌感染的手部慢性特殊感染患者,结合培养结果,分枝杆菌阳性率达到66%,再次证明了非结核分枝杆菌感染是沿海地区手部慢性特殊感染的主要病原体,尤其是海分枝杆菌。 第三部分:PCR-反向斑点杂交法检测病理表现为慢性肉芽肿性炎症的病理蜡块