甘草黄酮具有广泛的药理学活性。甘草黄酮的美白作用在现代医学及化妆品行业中的应用极为广泛。其美白原理主要是通过抑制酪氨酸酶的活性来抑制体内黑色素的合成,从而减少皮肤色斑的产生。本论文第一部分主要以甘草黄酮含量及酪氨酸酶活性抑制率为评价指标,以聚酰胺柱作为分离条件,考察了聚酰胺分离甘草黄酮的工艺。确定聚酰胺选用规格、甘草黄酮在分离过程中的pH值、料液比、上样液浓度、洗脱剂的浓度、洗脱剂的流速、洗脱剂的用量等。通过实验得到,以聚酰胺柱为分离条件分离具酪氨酸酶活性的甘草黄酮分离的最佳工艺为30～60目聚酰胺,上样液pH值为6,料液比(甘草黄酮粗提物:聚酰胺)为32.48mg:1g,上样浓度为3.215mg·mL-1,洗脱剂乙醇浓度为70%,洗脱流速为3 mL · min-1,洗脱剂用量为100 g甘草黄酮粗提物需70%乙醇11 mL洗脱。通过验证实验得到,该方法筛选的工艺收率高,成本低,安全,操作简便,避免使用有机溶剂,适合工业化大生产。论文同时考察了大孔树脂分离甘草黄酮的工艺。以甘草黄酮含量及酪氨酸酶抑制活性为评价指标,在考察大孔树脂分离条件分离具有酪氨酸酶活性的甘草黄酮最佳工艺的同时,对聚酰胺、大孔树脂分离纯化甘草黄酮做了对比。大孔树脂分离纯化甘草黄酮的最佳工艺为:SP825大孔吸附树脂,上样液pH值为3,上样浓度为4.22 mg · mL-1,洗脱剂乙醇浓度为80%,洗脱流速为2mL · min-1,洗脱剂用量为100 g甘草黄酮粗提物需80%乙醇15 mL洗脱。实验结果显示,大孔树脂与聚酰胺均可作为分离纯化具有酪氨酸酶活性的甘草黄酮的分离材料。通过验证实验得到,上述两种方法筛选的工艺收率高,成本低,安全,操作简便,避免使用有机溶剂,适合工业化大生产。论文第二部分探讨了甘草粗提物中具酪氨酸酶抑制活性的有效部位,我们按照甘草中所含成分极性的不同进行分离,即将甘草醇提物依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取。测定石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水溶部分的酪氨酸酶抑制活性,分别为35.39%、67.23%、40.36%、15.12%。与甘草醇提取物的酪氨酸酶活性65.5%相比,乙酸乙酯部分的活性最强。通过活性引导,分段分离的理念,我们对乙酸乙酯部分进行了进一步的分离。即分别从乙酸乙酯部分中分离得到石油醚:乙酸乙酯(40:1)、石油醚:乙酸乙酯(20:1)、石油醚:乙酸乙酯(10:1)、石油醚:乙酸乙酯(5:1)、石油醚:乙酸乙酯(2:1)、石油醚:乙酸乙酯(1:1)、石油醚:乙酸乙酯(1:2)、乙酸乙酯部分、甲醇部分。然后测定各部分的酪氨酸酶抑制活性。结果他们的酪氨酸酶抑制活性分别为2.14%、6.33%、30.38%、88.32%、81.61%、60.98%、48.89%、34.11%、23.79%。根据以上的实验结果,我们确定了甘草中具有酪氨酸酶抑制活性的部分存在于石油醚:乙酸乙酯(5:1)、石油醚:乙酸乙酯(2:1)部分中。本研究工作优化了具有酪氨酸酶抑制活性的甘草黄酮分离纯化工艺,为工业化生产具酪氨酸酶抑制活性的甘草总黄酮美白剂提供了研究基础。同时探讨了甘草黄酮中对酪氨酸酶抑制活性较高的片段部分,为今后甘草黄酮具有酪氨酸酶抑制活性的有效部位的研究奠定了理论基础。