骨形态发生蛋白复合多孔钛铌合金试件的实验研究

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目的:本课题利用新型多孔钛铌合金试件为骨组织再生工程构架,观察复合骨形态发生蛋白(Bone Morphogenetic Protein, BMP)的多孔钛铌合金试件在体外体内表现出来的特性。进一步为研制新型多孔人工关节假体或其他骨组织再生骨植入物提供基础实验依据。方法:自行研制出70%孔隙度的钛铌合金试件,根据钛铌合金试件是否复合骨形态发生蛋白(BMP)进行实验分组:A:单纯多孔钛铌合金实验试件;B:复合BMP的多孔钛铌合金实验试件。体外实验部分:将BMSCS悬液与多孔钛铌合金试件按实验分组复合,观察BMSCS于合金试件细胞支架贴附后移入相应培养基培养。于不同时间观察点取材,通过倒置相差显微镜、扫描电镜、成骨细胞表型检测等方法对合金支架表面及孔洞内BMSC生长以及成骨分化进行观察鉴定。体内试验部分:将A、B组实验试件植入兔大腿肌肉内,分别取10天、20天、30天实验试件周围0.5cm范围内组织,通过组织切片HE染色它们在体内的组织相容性、周围组织生长分化情况及组织-金属界面结合情况。使用SPSS17.0软件包进行统计分析,计量资料以均数士标准差表示,组间同一时间各指标比较采用组间方差分析。结果:体外实验发现:倒置相差显微镜、扫描电镜等方法显示兔骨髓间充质干细胞在未复合BMP的合金试件表面及试件孔洞内黏附增殖正常,表现出良好的细胞相容性,其成骨细胞表型检测呈阴性。而兔骨髓间充质干细胞在复合BMP的合金试件内表现出向成骨细胞转化,其成骨细胞表型检测呈阳性。体内试验发现:实验试件周围软组织切片HE染色检测显示:10、20、30天肌肉内合金试件周围0.5cm范围组织有轻微的炎症反应和异物反应。其中复合BMP组的周围组织在10天时镜下可见有新生血管形成;20天时镜下可见有多个新生血管形成,局部可见肥大、深染的纤维细胞;30天时镜下可见组织内有钙组织生成。结论:1、体外兔骨髓间充质干细胞在单纯多孔钛铌合金材料表面粘附及增殖良好,细胞能沿孔壁向多孔合金试件内部生长,但是未表现出成骨特性。2、体外兔骨髓间充质干细胞在复合BMP的多孔钛铌合金试件中可经诱导向成骨细胞分化,并可在多孔金属试件内的空间结构中形成钙组织。3、多孔钛铌合金试件在兔肌肉中中表现出轻微的炎症反应和异物反应,其材料本身对于周围组织有诱导血管生成的效果,但是作用效果缓慢。4、复合BMP的多孔钛铌合金植入兔肌肉内可以促进其周围组织中早期的血管长入、成纤维组织形成及纤维组织的改建,为骨组织的生成创造条件。
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