一株生防放线菌的抗菌活性及其应用研究

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设施农业是我国传统农业向现代农业转变的主要形式之一,同时为我国无公害农业的产业化经营提供了设施保障。病害频繁发生是威胁设施农业发展的主要限制因子。利用有益微生物及其代谢产物来防治园艺作物病害,已成为一个十分活跃并具有巨大应用前景的领域。本试验旨在从土壤中分离筛选出对辣椒疫霉病菌、黄瓜枯萎病菌等园艺作物病害有良好拮抗效果的生防菌,探求用于园艺作物病害生物防治的新资源,并对其产生的抑菌活性物质进行初步的研究。通过对供试13株放线菌进行系统的筛选,最终获得拮抗活性最高的04菌株,其对辣椒疫霉病菌的抑制率高达93.0%。经初步鉴定,04菌株属于链霉菌属金色类群No.B5547杀真菌素链霉菌相似种。玻皿培养法及盆栽测定法结果表明,低浓度发酵滤液(5%发酵滤液)浸种处理后对辣椒、番茄、黄瓜种子发芽率影响不大,且对幼苗生长具有一定的促进作用。草莓的田间防效试验研究结果表明,采用蘸根处理的草莓发病率低于不蘸根的清水对照,防治效果为65.1%,表现出较强的防病作用。通过单因素和均匀设计实验,对04菌株的发酵培养基和发酵条件的优化,获得了最佳的培养基组成和发酵条件。培养基的组成为:黄豆饼粉34.0 g/L,可溶性淀粉6.0 g/L,蔗糖2.0 g/L,鱼粉12.0 g/L;在28℃,150 r/min振荡培养条件下,最佳发酵时间为7d左右,发酵液初始pH值为7.0,培养36~48 h的种子液以10%的接种量转接有利于提高抑菌活性。采用微波处理发酵液,在一定条件下,微波能杀死发酵液中的活细胞,但对发酵液抑菌活性影响很小。微波除菌可代替常规滤膜除菌,是一种快速、简便的发酵液活性检测方法。摸索出04菌株发酵液的预处理方法,并确定乙酸乙酯为04活性物质提取溶剂,为进一步分离纯化奠定基础。生物活性测定结果表明,抗菌粗提物抑菌谱很广,对辣椒早疫病菌、辣椒疫霉病菌、小麦赤霉病菌等15种植物病原菌都有很好的抑制效果,且抑菌活性较强,其中辣椒早疫病菌和辣椒疫霉病菌的抑菌圈直径分别为32 mm和30 mm。对菌株04等放线菌进行了固态发酵生产农用抗生素的初步探索。结果表明,利用放线菌固态发酵生产农用抗生素的思路是可行的。在固态发酵条件下,供试菌的抗生素
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