黄麻组培再生和胚性悬浮细胞体系构建的研究

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黄麻,为椴树科黄麻属一年生草本韧皮纤维作物,是世界上最重要的纤维作物之一。其主要的栽培品种有:“圆果种”(Corchorus capsularis L.)和“长果种”(Corchorus olitorius L.)。由于黄麻具有纤维产量高、质地柔软、吸湿性能好等诸多优点,广泛应用于商业、工业和建筑业领域。因此黄麻的组织培养技术的研究也愈发重要,通过组织培养,获得优质的材料,为黄麻的综合利用提供参考。本试验以黄麻为试验材料,采用黄麻组培苗的幼茎为外植体,诱导胚性愈伤组织,建立植株再生体系和胚性悬浮细胞体系。通过本试验的研究,获得如下的结果:1黄麻组培再生体系的研究(1)为了筛选黄麻愈伤组织的诱导培养基,试验选用黄麻圆果种和长果种各两个品种为试验材料,以黄麻组培苗的幼茎为外植体,利用均匀设计法对圆果种和长果种进行愈伤组织诱导。试验结果表明,愈伤组织的诱导效果为黄麻179>梅峰四号>龙溪长果>广巴矮。其中黄麻179的最佳诱导培养基为:MS+0.53 mg/L 2,4-D+2.0 mg/L 6-BA。梅峰四号的愈伤组织的最佳培养基为:MS+2.0 mg/L TDZ+0.5 mg/L 2,4D。龙溪长果的愈伤组织的最佳培养基为:MS+2.0 mg/L TDZ+2.0 mg/L 6-BA。广巴矮的愈伤组织的最佳培养基为:MS+2.0mg/L TDZ+2.0 mg/L 2,4-D+2.0 mg/L 6-BA。(2)选用生长良好的四种基因型黄麻愈伤组织为外植体材料,采用正交设计法对不定芽和不定根进行诱导,在诱导过程中,研究基因型和激素组合的影响。试验结果表明,四个品种的黄麻愈伤组织的再生能力差异显著,诱导效果为黄麻179>梅峰四号>龙溪长果>广巴矮。黄麻179和梅峰四号获得再生植株,龙溪长果诱导出不定根,广巴矮只诱导出不定芽。长果种黄麻再生能力差,再生率低。激素组合对黄麻愈伤组织的影响同样显著,黄麻179和梅峰四号在MS+1.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+1.5 g/L Vc诱导出不定芽,在MS+2.0 mg/L NAA+0.5 mg/L (1.0 mg/L) IBA诱导不定根,获得再生植株,且长势良好。龙溪长果的不定芽诱导的最佳培养基为:MS+1.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+1.5 g/L,诱导率为22.6%。2黄麻胚性细胞悬浮系的研究(1)选用生长良好的圆果种黄麻愈伤组织为材料,利用不同激素组合对胚性愈伤组织进行诱导,在诱导过程研究了基因型和激素组合的影响。试验结果表明,黄麻179愈伤组织向胚性愈伤组织的转变比梅峰四号容易,胚性愈伤组织质量好且诱导时间短。两个品种的黄麻愈伤组织在MS+0.1 mg/L TDZ+O.3 mg/L6-BA+0.3 mg/L NAA上的诱导效果最好,诱导率分别为54.62%和43.88%。(2)利用生长良好的胚性愈伤组织为试验材料构建悬浮细胞系,研究培养基、接种量、装液量、pH、基因型的影响。试验结果表明,黄麻胚性愈伤组织在B5培养基,装液量40mL,接种量1.0 mL时可成功获得细胞悬浮细胞系。不同基因型的黄麻在悬浮细胞增殖和溶液pH值上差异显著。
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