蚓激酶的分离纯化及部分性质研究

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该文以赤子爱胜蚓大平二号为原料,探索蚓激酶的分离工艺,并对其前几步工艺进行了优化.1>通过对不同的沉淀法分离效果的比较,发现硫酸铵分步盐析是一条不错的粗提工艺.2>对两种凝胶柱层析和超滤进行了工艺比较;在处理量上,超滤的优势比较明显,而且活力回收比凝胶过滤要高,可以规模化,电泳条带显示两者差异不大.3>将超滤液进一步通过DEAE-C层析、疏水层析后,分得两个电泳纯的组分,其中第二个组分比活可以达到2656IU/mg,经反相高效液相检测为单一峰.SDS-PAGE显示为单一条带,说明为单体酶,检测的分子量分别为30733和34219.4>对第二个活力组分的性质进行了初步研究,发现它在pH3.6~10.6之间活力变化不是很大,说明该酶的pH稳定性比较好;最适pH为范围pH6.0~9.6;在55℃加热1个小时,活力基本不变,在60℃加热1个小时,活力减少50﹪,说明该酶的热稳定性良好.
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