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本实验以苹果及其砧木山定子（M.baccta(L.) Borkh）、平邑甜茶（M.hupehensis var.Pinyiensis Jing）和小金海棠（Mallus xiaojinensis Cheng etJiang）为试材，研究了苹果的铁素营养问题。第一，以山定子幼苗为材料，研究易缺铁黄化苹果砧木的铁素吸收特性；第二，以山定子、平邑甜茶和小金海棠的梢段为外植体，建立了三种抗缺铁胁迫能力不同的苹果砧木的无性系，研究继代培养和生根培养的条件；第三，以嘎拉、美富两种苹果品种试管苗的叶片为材料，用农杆菌介导法转化铁贮藏蛋白基因（Ferritin基因），研究影响苹果高效转化的因素。结果如下： 1、山定子幼苗的铁吸收能力受根生长介质的pH和介质中有效铁浓度的影响，低铁和高pH都不利于铁的吸收。在8—12天缺铁胁迫情况下，幼苗生长介质的pH、根的高铁还原力都发生以3—4天为周期的升降有序的节律性变化；在供铁充足的情况下也存在这种节律性变化，只是变化幅度小于缺铁胁迫时的情况。 在25天的缺铁胁迫情况下，山定子植株生长受到抑制，根茎比提高，新叶黄化，根的铁还原力和铁吸收速率降低。 2、以温室生长的山定子、平邑甜茶和小金海棠三种苹果砧木苗梢段为外植体，进行组织培养。同样的取材时间和培养条件下，基因型是影响外植体褐变程度最关键的因素，其中山定子褐变最严重。通过转接到新鲜培养基上，结合黑暗处理，解决了初始培养中的褐变问题。 继代培养中，不同浓度BA对不同基因型材料生长发育的影响不同，其中山定子以添加0.8-1.0mg/L BA为好，平邑甜茶以添加0.5mg/L BA时不出现玻璃化现象且有较高的增殖系数，而小金海棠的继代生长则以添加1.0-1.5mg/L BA为好（随着继代代数增加，还可适当降低BA的用量）。不同的基因型材料有各自适宜的BA/NAA浓度配比范围：山定子0.8-1.0/0.05-0.1mg/L；平邑甜茶0.5/0.05或0.5/0.1mg/L；小金海棠1.0/0.1mg/L；培养中保持BA/NAA的浓度配比在上述范围内波动，有利于试管苗正常健壮的生长。 不同基因型的试管苗生根表现不同：在附加不同浓度IBA的1/2MS生根培养，当IBA浓度为0.5mg/L时，平邑甜茶生根率达90％、小金海棠达30％，山定子没有生根。随继代代数增加，试管苗生根能力提高。 3．以嘎拉和美富试管苗的叶片为试材月携带铁贮藏蛋白基因的农杆菌队BA4404）侵染46分钟，黑暗27℃培养3天；在含筛选抗生素Km50和；Cb400mg／L的诱导分化培养基（改良 MS＋sing几 BA＋0．Zing／L NAA）上暗培养2刁周后照光，每两周换一次新鲜培养基，继续筛选：适当降低选择压，有利于转化材料的生长。获得了美富和嘎拉的抗性愈伤讲经GUS组织化学染色检测部分为阳性，初步确定了外源基因的整合。