PI3KC3与Beclin1在大鼠肝癌组织中表达及其相关性研究

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目的:检测PI3KC3(Ⅲ型磷脂酰肌醇-3激酶)与Beclin1在大鼠肝癌组织和正常肝组织中的表达,探讨PI3KC3和Beclin1与肝癌发生发展的关系,以及二者的相关性。方法:选取健康雄性SD(Sprague-Dawley)大鼠60只,随机分为肝癌组(n=50)和对照组(n=10)。肝癌组大鼠用4mg/ml的二乙基亚硝胺(Diethylnirtosamine,DEN)液以25mg/kg的剂量腹腔注射,每周3次,对照组予以等量的生理盐水腹腔注射。第16周,行肝脏B超检查确定肝脏有无占位性结节。第18周处死所有大鼠,将肝癌组的大鼠肝脏结节及对照组的大鼠肝脏组织行HE染色,判断大鼠肝癌造模成功后,采用Edmondson四级分级法将肝癌组标本按不同分化级别进行分组。分别用RT-PCR和免疫组化法检测肝癌组和对照组肝脏组织中PI3KC3和Beclin1的表达水平。采用单因素方差分析进行各组间差异显著性分析,及pearson相关性分析进行相关性检验。结果:1.第18周处死所有大鼠,其中肝癌组34只,对照组8只。将肝癌组织标本共30例及对照组肝脏组织标本8例行HE染色,根据Edmondson四级分级法,进行下一步实验分组:肝癌高分化组(n=9)、肝癌中分化组(n=15)、肝癌低分化组(n=6)、肝癌未分化组(n=0),以及对照组(n=8)。2.RT-PCR检测PI3KC3 m RNA和Beclin1 m RNA在高分化组、中分化组和低分化组中表达均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。在低分化组中表达高于高分化组和中分化组,差异有统计学意义(P<0.05)。在中分化组和高分化组中表达差异无统计学意义(P>0.05)。3.免疫组化检测PI3KC3蛋白和Beclin1蛋白在高分化组、中分化组和低分化组中表达均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。在低分化组中表达高于高分化组和中分化组,差异有统计学意义(P<0.05)。在中分化组和高分化组中表达差异无统计学意义(P>0.05)。4.相关性分析显示:PI3KC3 m RNA和Beclin1 m RNA呈正相关性(r=0.695 P=0.000),PI3KC3蛋白和Beclin1蛋白呈正相关性(r=0.691P=0.000)。结论:PI3KC3和Beclin1基因在大鼠肝癌组织中均高表达,且分化程度越低,其表达越高,两者表达呈正相关。
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