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通过体外实验,建立重金属Cd的雄性生殖损伤模型,然后再探索矢车菊素-3-O-葡萄糖苷(C3G)对重金属Cd引起雄性生殖毒性的干预作用以及具体机制,为矢车菊素-3-O-葡萄糖苷营养功能的开发及利用食源性功能成分提供理论依据。本实验选用MTT的方法,确定CdSO4对R2C细胞的半抑制作用浓度;通过MTT方法检测不同浓度C3G对重金属Cd暴露的R2C增殖能力的影响,并确定C3G的作用浓度；荧光显微镜观察C3G对重金属Cd暴露的R2C细胞形态的作用；化学发光法(chemiluminescence,CL)检测细胞内产生ROS水平变化;流式细胞术(flow cytometry, FCM)检测R2C细胞线粒体膜电位的变化；Western blot测定C3G与Cd刺激后R2C细胞内与孕酮合成相关以及抗氧化相关蛋白的表达量；放射免疫法(radioimmunoassav, RIA)测定R2C细胞孕酮合成功能的变化,结果如下：重金属Cd可以抑制R2C的增殖,且半抑制作用浓度IC50为(44.80±0.0479) μnol/L。C3G可以抑制重金属Cd暴露的R2C细胞增殖能力的下降,且在浓度在5～80μmol/L之间时有剂量依赖关系。荧光显微镜观察结果表明,Cd可以影响R2C细胞形态,Cd作用24 h,细胞变亮、变圆、体积变小,而C3G可以改善重金属Cd对R2C造成的形态的损伤。ROS检测结果表明,重金属Cd可以提高R2C细胞中ROS的产生,且ROS产生量会随时间的延长而增加,而C3G可以抑制重金属Cd暴露的R2C细胞ROS的产生,不会随时间的延长而增加。流式细胞仪检测结果表明,重金属Cd可以显著提高线粒体损伤,C3G可以对重金属Cd暴露的R2C细胞线粒体的损伤起到一定的抑制作用。Western Blot结果表明,只加入重金属Cd的损伤组细胞,孕酮合成通路关键蛋白StAR蛋白表达量下降,与损伤组相比,C3G预保护组R2C细胞StAR蛋白表达量有所提高;同时也检测了抗氧化相关蛋白SOD2的表达情况,与正常组相比,重金属Cd损伤组R2C细胞SOD2蛋白表达量显著上调,而加入花色苷后,SOD2蛋白的表达量有所下调,且有显著性。C3G可以清除重金属Cd暴露的R2C细胞产生的过量的氧自由基(ROS),从而减少细胞中的ROS量,ROS的减少可以使线粒体膜电位的下降比率降低,对线粒体损伤有干预作用,同时,C3G可以对重金属Cd引起的孕酮通路相关关键蛋白StAR蛋白下降起到干预作用,C3G对线粒体的保护作用和对StAR蛋白的上调,促进了胆固醇从线粒体膜外向线粒体膜内的转运,从而增加了孕酮合成量。